Acasă » sistem de ferme » Testul PCR pentru chlamydia a fost negativ. Despre reacția în lanț a polimerazei (PCR) pentru chlamydia. Diagnosticul infecției cu chlamydia

Testul PCR pentru chlamydia a fost negativ. Despre reacția în lanț a polimerazei (PCR) pentru chlamydia. Diagnosticul infecției cu chlamydia

O analiză pentru chlamydia la femei este studiată prin tehnica PCR, dezvăluind cu mare acuratețe prezența și concentrația bacteriilor dăunătoare în organism pe baza studiilor ADN ale celulelor biomateriale.

Testarea pentru chlamydia la femei este un studiu important. La urma urmei, infecția cu chlamydia nu este doar o boală transmisă prin actul sexual, ci și o boală atât de insidioasă care poate provoca infertilitate primară sau avort spontan, fără simptome speciale.

Studiile efectuate prin tehnica PCR sunt efectuate pentru a diagnostica infectiile, provocând următoarele virusuri, cum ar fi micoplasma, ureaplasma, chlamydia și altele. Pentru a examina prezența chlamidiei și a altor boli infecțioase, trebuie să donați sânge pentru teste, frotiuri pentru cultură bacteriologică sau răzuire.

Dacă treceți un frotiu pentru semănat sau răzuire, atunci chlamydia, ca cea mai insidioasă boală transmisă prin contact sexual, poate să nu fie detectată. La urma urmei, bacteriile atipice, cum ar fi chlamydia, se înmulțesc și se concentrează în interiorul altor celule ale corpului. De aceea, o astfel de boală precum chlamydia (și ureaplasma) nu este practic identificată în studiile din cadrul analizelor convenționale.

Perioada de incubație a dezvoltării chlamydiei înainte de determinarea simptomelor severe durează până la 3 săptămâni.În acest timp infecția are timp să se integreze în celula corpului, atât la bărbați, cât și la femei. Diagnosticul PCR vă permite să identificați virusul mai devreme și să preveniți răspândirea unui astfel de agent patogen precum ureaplasma.

Când corpul este deja capturat de boală, la bărbați apar următoarele simptome:

este urina tulbure;
scurgeri matinale din uretra;
mâncărime și semne de arsură în timpul urinării;
stare generală de slăbiciune cu febră;
descărcare cu impurități sângeroase în timpul urinării și chiar se observă ejaculare sângeroasă.

Simptomele chlamydia la femei sunt:

prezența unui miros neplăcut al organelor genitale;
scurgeri gălbui ale compoziției mucoase din vagin;
mâncărime și arsuri neplăcute în timpul urinării;
slăbiciune a sănătății cu o ușoară creștere a temperaturii.

Agenții infecțioși precum chlamydia și ureaplasma sunt periculoși, deoarece pot prezenta simptome mici de detectat și în cele din urmă să dispară. O formă neglijată de activitate în organism a agenților patogeni, cum ar fi chlamydia și ureaplasma, duce la deteriorarea organe interne, atât la bărbați, cât și la femei.

Analiza Chlamydia - metode de depistare a chlamydia la bărbați și femei

Este permis să se diagnosticheze chlamydia folosind o metodă de cercetare de laborator, în care biomaterialul este luat pentru lucru. Există o serie de metode pentru detectarea agenților patogeni, cum ar fi chlamydia și ureaplasma:

(acesta este un studiu genetic și biologic al metodelor de reacție în lanț a polimerazei) detectează cu o acuratețe de 100% corpuri dăunătoare în biomateriale, cum ar fi areaplasma, chlamydia și altele.
Examenul cultural bacteriologic, aici este prelevat materialul pentru semănat pentru cultivarea, depistarea și identificarea bacteriilor (chlamydia, ureaplasma și altele) într-un mediu nutritiv special.
ELISA (acesta este un imunotest enzimatic) trebuie efectuat pentru a detecta anticorpii la un agent patogen identificat.
RIF (microscopie imunofluorescentă) - o analiză care trebuie trecută pentru a identifica în detaliu chlamydia.

Agentul cauzal al chlamidiei urogenitale, Chlamidia trachomatis, este un microorganism care se poate multiplica numai în interiorul celulei (cel mai adesea celulele epiteliului organelor genito-urinale). Chlamydia este adesea caracterizată printr-un curs latent și asimptomatic, care este motivul frecvenței complicațiilor care apar pe fondul său.

Multă vreme, înainte de crearea unei metode de amplificare a acizilor nucleici, diagnosticul de chlamydia a fost dificil, deoarece agentul patogen nu este vizibil în timpul examinării microscopice convenționale. S-a încercat introducerea unei metode citologice cu colorare pe frotiu conform Romanovsky-Giemsa și identificarea incluziunilor intracelulare specifice.

Dar o astfel de metodă a necesitat costuri semnificative de resurse economice, timp și disponibilitatea unui asistent de laborator calificat cu experiență. Și toate acestea cu un conținut scăzut de informații din această metodă - aproximativ 10%.

Arata tot

1. Introducere

Mai multe informații despre Chlamydia trachomatis (Chlamydia trachomatis) și modalitățile de infectare pot fi găsite în acest articol (). Și aici ne vom opri mai detaliat asupra metodelor de diagnosticare a chlamidiei urogenitale și de descifrare. rezultate posibile analize.

Primul test serologic introdus pentru a confirma diagnosticul de chlamydia urogenitală a fost testul de fixare a complementului (abreviat CFR). Testul și-a pierdut rapid relevanța din cauza frecvenței mari a rezultatelor fals pozitive.

Timp de două decenii, una dintre cele mai informative metode de diagnosticare a chlamidiei urogenitale a fost considerată metoda de imunofluorescență directă folosind anticorpi monoclonali. Pe fondul metodelor de mai sus, s-a distins prin rate puțin mai mari de specificitate și sensibilitate. În același timp, metoda a impus dotarea laboratorului cu echipamente și reactivi scumpi.

O altă metodă care este și astăzi relevantă este detectarea chlamidiei în cultura celulară. Această metodă va fi descrisă mai jos.

Într-un fel sau altul, o altă analiză pentru chlamydia este acum larg răspândită - un studiu al secreției sau răzuirii din uretra, vagin sau canalul cervical prin PCR.

1 diagnostic PCR. Protocoalele clinice federale și europene pentru diagnosticul chlamidiei urogenitale recomandă metoda de amplificare a ADN-ului. În raport cu depistarea inițială a infecției, specificitatea acesteia este de 100%, sensibilitatea 98-100% (nivel de evidență A, nivel de validitate I).
2 NASBA (metoda de amplificare a ARN).
3 Izolarea chlamidiei în cultura celulară.
4 Metoda citologică. Această metodă de examinare a frotiului nu este foarte informativă în diagnosticul chlamidiei urogenitale (specificitate 10-12%): există o probabilitate mică de a detecta incluziuni intracelulare - așa-numitele corpi Halbershetder-Provachek. În plus, cu microscopie, se numără numărul de leucocite (o creștere a numărului lor este dovada unui proces inflamator), precum și un studiu al florei și detectarea ciupercilor asemănătoare drojdiei.
5 Teste serologice.
6 Ultimele trei metode (3,4,5) pot fi utilizate numai în anumite situații în care metodele de amplificare a ADN și ARN (PCR și NASBA) nu sunt disponibile.

Sunt prescrise teste pentru chlamydia:

1 Screeningul infecțiilor genitale în timpul sarcinii și pregătirea înainte de concepție.
2 Se recomandă efectuarea anuală a testelor pentru femei și bărbați cu vârsta sub 25-30 de ani, precum și pentru persoanele care nu au avut parteneri permanenți în ultimul an sau și-au schimbat recent partenerii.
3 Persoane cu simptome de uretrita, vaginita, cervicita.
4 Femei cu BIP (salpingooforită, endometrită și așa mai departe).
5 Dacă pacientul are orice altă infecție sexuală.
6 Tineri cu inflamație a epididimului și orhită.
7 În pregătirea intervenției intrauterine.
8 Cu pneumonie și conjunctivită purulentă la nou-născut.

2. PCR pentru Chlamydia trachomatis

Esența metodei PCR este detectarea materialului genetic (ADN) în proba de testat și completarea acestuia prin adăugarea de material „de construcție” (deoxinucleoribofosfați). Ca urmare, lanțul de ADN este alungit, detectarea lui devine posibilă folosind electroforeză și/sau fluorescență.

Toate manipulările sunt efectuate într-un dispozitiv special - un amplificator, care controlează independent schimbarea temperaturilor și fazelor de curgere în funcție de numărul de cicluri de amplificare necesare.

PCR poate detecta chlamydia deja la 3 zile de la infectare, cu risc mare, studiul se repetă la 2 săptămâni de la presupusa infecție.

În prezent, câștigă o mare popularitate. Cu ajutorul acestuia, sunt studiate atât caracteristicile calitative, cât și cantitative ale microflorei vaginale.

PCR în timp real se caracterizează prin timpi scurti de execuție, specificitate și sensibilitate ridicate (aproximativ 88-90%).

Dar pentru a confirma chlamydia urogenitală, un număr de autori recomandă utilizarea truselor PCR monocomponentă datorită sensibilității lor mai mari (100%) împotriva chlamydia trachomatis.

Acest sfat este relevant într-o situație în care medicul suspectează prezența infecției cu chlamydia la pacient, iar studiul este efectuat pentru a verifica diagnosticul. În absența unor simptome specifice la o femeie, este mai potrivit să se conducă PCR complexă(nivelul de valabilitate II).

3. Amplificarea ARN Chlamydia (NASBA)

Aceasta este o metodă relativ nouă pentru Rusia, dar mai informativă de biologie moleculară. Esența sa constă în detectarea în materialul (frătire, răzuire, urină și așa mai departe) a lanțurilor de ARN, a căror prezență însoțește procesul de construire și activitatea vitală a celulelor chlamydia.

ARN-ul este un purtător de informații genetice din ADN și un constructor al structurilor celulelor patogene prin sinteza proteinelor.

Prin prezența ARN-ului în rezultatele pozitive ale NASBA se poate judeca eficacitatea terapiei cu antibiotice în curs: se evaluează viabilitatea chlamidiei. PCR numai cu ADN nu are această capacitate.

NASBA poate fi folosit pentru a monitoriza vindecarea într-un moment mai devreme decât PCR. Pentru a monitoriza eficacitatea tratamentului, această metodă este relevantă după numai 14 zile de la ultima doză de antibiotice.

4. Cum se testează pentru chlamydia la femei?

Femeile pot face o analiză pentru chlamydia folosind metode PCR sau NASBA de la un ginecolog, dermatovenereolog.

Materialele pentru cercetare la femei sunt de obicei:

Răzuire din uretră, vagin, canal cervical în afara menstruației. Condiția este prezența celulelor epiteliale în materialul colectat. Când luați un frotiu regulat, secreții mucoase, puroi și altele asemenea, rezultatul poate să nu fie informativ.

Razuirea pentru analiză la femei este luată din deschiderea externă a uretrei, canalului cervical și fornixului posterior al vaginului.

1 Când se utilizează o sondă universală: după preluarea materialului, partea de lucru a sondei este ruptă și scufundată într-un tub Eppendorf cu o soluție de conservare.
2 Când utilizați o lingură Volkmann: clătiți-o într-o eprubetă cu o soluție de conservare. După aceea, recipientul este închis ermetic, iar instrumentul este dezinfectat și sterilizat.

Prima porțiune de urină liberă. În prima porțiune de urină este concentrat numărul maxim de celule epiteliale descuamate ale tractului urogenital. La femei, prima porțiune de urină eliberată liber este mai puțin informativă (sensibilitate 80-90%), prin urmare este folosită mult mai rar decât răzuirea. Cu toate acestea, nu există dovezi că urina de dimineață este mai semnificativă din punct de vedere diagnostic decât, de exemplu, urina din timpul zilei (nivelul de evidență II).

Urina este colectată chiar de pacientă într-un recipient curat, steril, uscat. Aproximativ 10 ml de urină sunt suficiente pentru studiu. Perioada de depozitare recomandată este de 24 de ore, în funcție de nivelul de temperatură necesar (+2С…+8С).

5. Caracteristici ale prelevării materialelor de la bărbați

Bărbații pot fi testați pentru chlamydia de către un urolog, dermatovenereolog, specialist în reproducere și androlog.

Materialele pentru cercetare la bărbați sunt de obicei:

Secreție din uretră, răzuire din uretră. Pregătirea pacientului: înainte de a lua materialul, nu urinați timp de 2-3 ore, cu scurgeri abundente - 15-30 de minute. În prezența secrețiilor patologice abundente (de exemplu, puroi), se recomandă îndepărtarea acestora cu un tampon de bumbac.

Procedura de răzuire pentru bărbați este destul de neplăcută, uneori dureroasă. Razuirea se face cu o sondă universală din orificiul extern al uretrei. După prelevare, partea de lucru a sondei este ruptă și scufundată într-un tub Eppendorf cu un lichid conservant.

Prima porțiune de urină eliberată liber (sensibilitatea este mai mare decât la femei - 85-95%).
Conform indicațiilor de analiză pentru chlamydia la bărbați, secretul glandei prostatei poate fi luat (cu infertilitate, prostatita și alte boli). Preparatul include abstinența sexuală timp de 2 zile. Secretul prostatei este preluat de un specialist calificat după masajul prostatei. Capul penisului trebuie curățat cu un tampon de bumbac steril.

După finalizarea masajului, sucul de prostată secretat în cantitate de 0,5-1 ml este colectat într-un tub Eppendorf uscat și închis ermetic. În absența unui secret, prima porțiune de urină este colectată (va conține întregul secret) prin analogie cu tehnica obișnuită descrisă mai sus.

Durata maximă de valabilitate a tuturor materialelor de mai sus este de 24 de ore cu respectarea strictă a regimului de temperatură în intervalul + 2C ... + 8C.

Materialul este livrat într-un recipient termic special cu elemente de răcire. Pentru depozitarea pe termen lung, materialul luat trebuie congelat pentru o perioadă de cel mult 1 lună la o temperatură de -20C. Este permisă o singură dezghețare a materialului.

6. Interpretarea rezultatelor PCR și NASBA

1 De regulă, rezultatele PCR și NASBA sunt disponibile în 24-36 de ore, în laboratoarele private timpul de răspuns pentru rezultate este mai mare.
2 Rezultatul poate fi „pozitiv” (se detectează chlamydia, adică pacientul are chlamydia) și „negativ” (nu se detectează chlamydia, adică pacientul nu are chlamydia urogenitală sau se obține un rezultat fals negativ).

La utilizarea metodelor de amplificare a acidului nucleic (NAAT), pentru o interpretare competentă a rezultatelor, trebuie respectate anumite condiții:

1 Un studiu de control pentru a evalua eficacitatea terapiei este prescris nu mai devreme de 1-1,5 luni după încheierea administrării medicamentelor (pentru PCR) și nu mai devreme de 14 zile pentru NASBA. Metoda PCR nu implică determinarea viabilității microorganismelor detectate, prin urmare, este necesar să așteptați un ciclu complet de modificare a epiteliului.
2 La colectarea primei porții de urină după ultimul act de urinare este necesară o pauză de cel puțin 3 ore. Cu scurgeri patologice abundente din uretra, urina este colectata la 15-20 de minute dupa ultimul act de urinare.
3 Există o opinie că modificările fondului hormonal duc la apariția inhibitorilor de amplificare (mucus, sânge, puroi și alte componente) în materialul de testat. Această situație este cea mai relevantă în timpul sarcinii, la femei.

Au fost propuse multe modalități de a rezolva această problemă, dar până acum niciuna dintre ele nu este recunoscută universal:

1 Situația cu inhibitorii de amplificare este relevantă pentru femeile care nu sunt însărcinate la 3 săptămâni după menstruație.
2 Când luați material în primele zile după menstruație, există posibilitatea unui rezultat fals negativ din cauza acumulării insuficiente a agentului patogen în epiteliu. Astfel, perioada optimă pentru luarea răzuirii este de 4 săptămâni după menstruație.
3 Nu este nevoie de pregătirea specială a pacientului (de exemplu, introducerea oricăror medicamente, aderarea la o anumită dietă) înainte de studiu. Nu va afecta rezultatul.
4 Există o problemă a așa-numitei inhibiții competitive. O situație similară apare atunci când un laborator folosește truse pentru diagnosticarea PCR a mai multor tipuri de microorganisme. Cu o predominanță semnificativă în proba oricărui tip de agent patogen, acesta din urmă poate „masca” prezența altor tipuri de microorganisme. Rezultatul va fi fals negativ.
5 Dacă se suspectează un rezultat fals pozitiv, este necesară o reexaminare. Această situație este relevantă în infecțiile asimptomatice cu încărcătură bacteriană scăzută. În acest caz, este posibil să se studieze același eșantion, sau să se ia unul nou, precum și să se utilizeze o altă metodă de testare sau chiar de cercetare (clasa de recomandare B, nivelul de valabilitate II). La identificarea un numar mare chlamydia în materialul original, un al doilea studiu ar fi redundant și nejustificat din punct de vedere economic.

7. Imunotestul enzimatic

Conform celor mai recente ghiduri federale, imunotestul enzimatic (ELISA) nu este utilizat pentru a diagnostica chlamydia urogenitală necomplicată (cervicita, uretrita etc.). Această „neîncredere” se datorează faptului că ELISA este mai relevant pentru leziunile severe, profunde ale chlamydia C. Trachomatis.

Metoda ELISA se bazează pe detectarea în sânge a anticorpilor specifici produși ca răspuns la antigenele chlamydia. Prin combinarea a trei clase de imunoglobuline din sângele pacientului, se poate aprecia severitatea și durata procesului infecțios.

După cum sa menționat deja, această metodă de detectare a chlamidiei urogenitale are o serie de dezavantaje:

1 Nu este informativ în diagnosticul de infecție ascendentă, cervicite și uretrite.
2 Frecvența mare a reacțiilor încrucișate.
3 Frecvența ridicată a reacțiilor fals pozitive.
4 Nu se pretează pentru monitorizarea vindecării după terapia cu antibiotice, deoarece timpul de existență a anticorpilor specifici în sânge este necunoscut;
5 Permite diagnosticarea leziunilor predominant profunde, cum ar fi chlamydia congenitală la nou-născuți (grad de recomandare A, nivel de evidență I).

Pentru ELISA se folosește sângele venos al pacientului, luat pe stomacul gol. În apărarea acestei metode, se poate observa:

1 Costul său mai mic în comparație cu PCR.
2 Specificitatea satisfăcătoare este de aproximativ 90%.
3 Execuție rapidă.
4 Ușurința colectării și depozitării materialelor.

8. Detectarea chlamydia în cultura celulară (pe mediu McCoy)

Această metodă este unică prin faptul că permite nu numai evaluarea calității terapiei, ci și determinarea sensibilității chlamydia la diferite grupuri de medicamente antibacteriene.

Esența metodei este infectarea culturii de celule tratate cu materialul colectat, urmată de inoculare pe un mediu nutritiv și incubare timp de două zile. Prezența chlamidiei în celulele obținute este determinată prin PCR.

Pentru a determina sensibilitatea la antibiotice, un mediu de creștere care conține un anumit agent antibacterian este introdus în cultura celulară tratată și incubat timp de 5 zile.

Eficacitatea medicamentului este determinată de absența sau întârzierea creșterii în anumite grupuri. Prezența creșterii indică rezistența la antibioticul adăugat în mediul nutritiv.

Dezavantajele acestei metode de diagnostic sunt durata ei (7 zile) și costul ridicat, deci este rar folosită în practica clinică. De obicei, indicația pentru numirea sa este terapia antibiotică ineficientă pe termen lung.

9. Metode expres

În străinătate, ca rutină, metode ieftine de depistare a infecției cu chlamydia, modificate teste serologice.

9.1. Sistem de testare Chlamydia-antigen ELISA medac

Sistemul de testare funcționează pe principiul analizei ELISA în fază solidă. Sistemul de testare finit este acoperit cu anticorpi specifici gata preparati, modificați genetic. Acești anticorpi sunt asociați cu un complex enzimatic special.

Când antigenele se leagă de anticorpi, enzimele sunt eliberate, apare o strălucire galben-verde, a cărei intensitate este luată în considerare de spectrofotometru.

Spre deosebire de ELISA obișnuită, unde materialul pentru studiu este sânge, atunci când se utilizează acest sistem de testare, substratul este un frotiu sau răzuire luată de la o femeie sau un bărbat. Sensibilitatea acestei metode este de aproximativ 65-70%, iar specificitatea este de 90-100%.

9.2. RECIF

Reacția de imunofluorescență (RIF) se bazează pe legarea directă a antigenelor de anticorpi marcați care dau o strălucire verde. Corpurile chlamidiene sunt iluminate în interiorul celulei. Rezultatul este evaluat prin microscopie fluorescentă.

Sensibilitatea acestei metode este de aproximativ 50%, ceea ce este asociat cu o frecvență ridicată a rezultatelor false. Acest lucru se datorează percepției subiective a rezultatului (studiul este efectuat de un asistent de laborator) și probabilității mari de reacții încrucișate și încălcării tehnicii de prelevare a materialului biologic. Folosind această metodă, este imposibil să se evalueze eficacitatea tratamentului.

Pe fondul tuturor deficiențelor, principalele avantaje ale RIF sunt costul scăzut, ușurința de implementare și timp scurt obtinerea unui rezultat. De aceea, RIF este încă folosit în unele țări ca test de rutină pentru chlamydia urogenitală.

Dacă testele au arătat chlamydia în urină, este rău. Deci, vorbim despre o boală atât de dificilă precum chlamydia. Aparține bolilor cu transmitere sexuală și, prin urmare, este foarte periculos pentru sănătatea reproductivă atât a bărbaților, cât și a femeilor. Este posibil să se determine în mod fiabil chlamydia în urină, ce metode de cercetare sunt de mai bună calitate?

Chlamydia folosește un mod foarte original printre bacterii de a trăi și de a se reproduce. Ele sunt încorporate în celulele umane și fiecare tip de chlamydia „selectează” un anumit tip de ele. În țesuturile afectate, apare inflamația, imunitatea este perturbată, încep procesele adezive. În prezent, chlamydia este destul de comună, mai ales pentru că se poate transmite nu numai pe cale sexuală, ci și pe cale casnică (articole de igienă, secreții mucoase).

Cum se detectează chlamydia

Pentru a afla dacă există chlamydia în urină, nu este suficient să efectuați o analiză de rutină. Este necesară cercetarea infecțiilor latente. Una dintre aceste metode este PCR în urină pentru chlamydia, adică metoda reacției în lanț a polimerazei.

Cu PCR, urina pentru chlamydia este examinată timp de o zi sau două, adică rezultatul poate fi obținut destul de curând. Practic detectează prezența agenților patogeni în organism cu aproape 100% (până la 96% pentru a fi exact), iar un răspuns fals pozitiv este posibil numai în cazurile în care regulile de prelevare și analiză sunt încălcate. Această analiză pentru chlamydia în urină este prescris nu numai conform indicațiilor, ci și pentru prevenire: în timpul examinării medicale anuale și înregistrării femeilor însărcinate.

Există o altă modalitate de a determina chlamydia în urină - aceasta este însămânțarea sau metoda de cultură. Astăzi este foarte scump, dar și eficient, detectând infecția în 80-90% din cazuri. În plus, conform rezultatelor culturii de urină pentru chlamydia, se va ști imediat ce antibiotic poate învinge agentul patogen. În studiile de rutină, această metodă nu este utilizată.

Tratamentul Chlamydia

Dacă este detectată o boală, ambii parteneri sexuali trebuie examinați și tratați cu atenție, în timp ce pe durata terapiei ar trebui să renunțe la intimitate. Doar un medic, pentru bărbați este un urolog-androlog, pentru femei - un ginecolog sau venereolog, poate selecta corect tratamentul chlamydia. Tratamentul cuprinzător va include nu numai eliminarea inflamației, ci și întărirea imunității, raționalizarea nutriției și aportul de vitamine. Neglijarea terapiei poate duce la probleme grave, până la infertilitate. Oamenii de știință au demonstrat de mult timp că se dezvoltă adesea într-un cuplu căsătorit. Pentru mai multe informații despre această problemă, vă rugăm să citiți linkul.

În diagnosticul chlamydia, dintre toate metodele existente, metoda PCR este recunoscută ca fiind cea mai fiabilă.* Metoda reacției în lanț a polimerazei pentru diagnosticarea chlamydia are o sensibilitate de 98-100%.

Avantajele diagnosticului PCR în chlamydia

1. Determinarea directă a chlamidiei în biomaterial.

O serie de metode utilizate în diagnosticul chlamydia, de exemplu, metoda ELISA, detectează numai anticorpi și/sau antigene ai agentului patogen, ceea ce nu este o confirmare directă a infecției cu chlamydia, ci indică doar posibila prezență a acesteia.

Metoda reacției în lanț a polimerazei (metoda PCR) este o metodă biologică moleculară care are ca scop identificarea fragmentelor de ADN specifice pentru chlamydia și indică direct prezența unei infecții.

2. Specificitate ridicată.

Specificitatea metodei PCR în diagnosticul chlamydia ajunge la 100%. Acest lucru datorită faptului că în biomaterialul analizat este detectat un fragment de ADN, materialul genetic al chlamydia. ADN-ul este parte integrantă a oricărui microorganism și nu poate exista în afara agentului patogen, cu excepția cazurilor de utilizare a medicamentelor antibacteriene, când ADN-ul agentului patogen poate fi determinat în decurs de o lună.

Nu același lucru se poate spune și pentru testele imunologice, în care reacțiile fals pozitive sunt frecvente din cauza anticorpilor și antigenelor cu reacție încrucișată.

3. Sensibilitate ridicată.

Pentru a efectua analiza PCR, este suficientă prezența celulelor individuale de chlamydia în biomaterial. Sensibilitatea analitică a analizei PCR este de 10-100 celule în biomaterial, când alte teste au 103-105 celule (metode microscopice, bacteriologice).

Metodele de rutină existente pentru diagnosticarea infecției cu chlamydia - microscopice, imunologice, bacteriologice - nu permit identificarea agentului patogen la 20-40% dintre indivizii infectați, în timp ce metoda PCR poate detecta chlamydia la aproape 100% dintre pacienți.

4. Universalitatea metodei PCR.

Împreună cu detectarea ADN-ului chlamydia în biomaterialul studiat, metoda PCR vă permite să detectați simultan mai mulți agenți patogeni, de exemplu, Trichomonas, gonococi etc.

5. Viteza de obținere a rezultatului.

Analiza PCR este complet automatizată, ceea ce vă permite să obțineți rezultatele în cel mai optim timp și, ca urmare, face posibilă obținerea unui tratament rapid și eficient.

6. Diagnosticul formelor latente și lente de chlamydia.

Infecția urogenitală cu chlamydia este asimptomatică, de exemplu, mai mult de 70% dintre femeile cu chlamydia sunt asimptomatice. Prin urmare, metodele de diagnosticare de rutină anterior nu permiteau detectarea acestei infecții. V anul trecut datorită utilizării pe scară largă a metodei PCR în practica clinică, se înregistrează mai multe cazuri de boală.

Chlamydia: caracteristici

O formă necomplicată de infecție cu chlamydia apare mai des la bărbați sub formă de inflamație a uretrei (uretrită), la femei - sub formă de inflamație mucopurulentă a membranei mucoase a colului uterin (cervicita), uretra (uretrită).

Infecția cu chlamydia predominant urogenitală apare într-o formă asimptomatică și începe să se manifeste în stadiul de complicații.

Pentru un diagnostic complet al chlamidiei urogenitale, PCR este utilizată pentru a preleva răzuit din uretră, urină, secreția de prostată la bărbați și răzuit din canalul cervical, vagin la femei.

Complicațiile frecvente ale chlamidiei urogenitale includ:

orhiepididimita, epididimita, prostatita, strictura uretrale;
cistita,
BIP (boală inflamatorie pelvină);
modificări erozive la nivelul colului uterin;
infertilitate.

LA posibile complicații Chlamydia atunci când este răspândită în afara tractului urogenital includ:

conjunctivită cu chlamydia;
faringita cu chlamydia;
hepatită cu chlamydia,
boala Reiter (combinând leziuni ale organelor genito-urinale, articulațiilor și conjunctivei); boala adezivă de o anumită etiologie.

Efectuarea diagnosticului PCR al infecției cu chlamydia este relevantă pentru pacienți:

în scopul examinării preventive;
cu plângeri caracteristice sau un diagnostic confirmat de boală cu transmitere sexuală;
atunci când planificați o sarcină;
examinarea femeilor însărcinate;
cu istoric obstetric și ginecologic împovărat;
cu suspiciune de chlamydia urogenitală;
înainte de intervenții chirurgicale asupra organelor genitale și pelvine;
cu suspiciune de conjunctivită, artrită de etiologie chlamidiană.

Laboratoarele CMD pentru cercetarea PCR dispun de cele mai bune echipamente si personal de inalta calificare. În toate etapele studiului PCR - de la preluarea biomaterialului până la eliberarea rezultatului finit - sunt respectate toate cerințele managementului calității, ceea ce exclude complet pătrunderea materialului genetic străin și primirea unui rezultat fals pozitiv.

Potrivit statisticilor, 100 de milioane de oameni se îmbolnăvesc de chlamydia în fiecare an în lume. Potrivit OMS, chlamydia urogenitală este cea mai frecventă infecție cu transmitere sexuală. Femeile și bărbații sunt mai susceptibili la boală, dar și copiii sunt infectați. În fiecare an, 100 de mii de femei rămân sterile din cauza chlamydiei. Infecția este cauza fătului mort, nașterea prematură și moartea nou-născuților.

Diagnosticul corect este esențial pentru un tratament de succes. Astăzi ne vom uita la metoda exactă de diagnosticare a chlamidiei - analiza PCR. Vom învăța cum să ne pregătim pentru analiză și ce nu ar trebui să facă bărbații și femeile înainte de a trimite materialul.

Deși infecția se transmite cel mai adesea pe cale sexuală, este posibil să se infecteze fătul în uter sau în timpul nașterii. Boala este cauzată de bacteria atipică Chlamidia trachomatis. Agentul cauzal este jumătate virus, jumătate bacterie și, prin urmare, greu de detectat.

Chlamydia este o boală cu transmitere sexuală

Perioada de incubație a bolii este de 2-4 săptămâni. Modalitățile de infectare cu chlamydia sunt sexuale vaginale și anale. mod casnic infecția are loc în saună și baie. La domiciliu, este posibil să transferați infecția de la mâinile contaminate la ochi sau când folosiți un prosop comun. Copiii se infectează în timpul nașterii când trec prin canalul de naștere al unei mame infectate.

Ce boli provoacă chlamydia?

Infecția cu chlamydia are loc în timpul contactului secrețiilor din organele genitale cu membrana mucoasă a partenerului. Consecințele frecvente ale infecției:

La bărbați, boala apare sub formă de inflamație a canalului urinar - uretrita.
Alte forme clinice comune de chlamydia la bărbați sunt cistita și prostatita.
Procesul inflamator al colului uterin la femei - cervicita.
Proctita este o inflamație a rectului.
Inflamația trompelor uterine și a mucoasei interioare a uterului - salpingită și endometrită.
Sarcina extrauterina. La sarcina extrauterinaîn 25–50% din cazuri, chlamydia este detectată într-un frotiu.
Infertilitatea la femei și bărbați se dezvoltă ca urmare a unui proces inflamator sau modificări cicatriciale în organele pelvine.

Chlamydia este un tip ascendent de infecție. Ele pornesc din tractul urinar inferior, iar crescând mai sus, provoacă procese inflamatorii și adezive care amenință infertilitatea. Chlamydia la bărbați provoacă o încălcare a potenței și a infertilității.

Gama de boli se extinde cu un sistem imunitar slăbit. În acest caz, organele respiratorii sunt afectate sub formă de pneumonie cu chlamydia. Se dezvoltă artrita și conjunctivita Chlamydia.

Identificarea chlamydia este dificilă deoarece în 50-67% din cazuri infecția este asimptomatică sau se manifestă cu semne asemănătoare altor infecții ale tractului genital.

În prezent, cea mai sensibilă metodă de depistare a chlamydiei este analiza PCR.

Are specificitate de 100% și este o metodă de diagnostic fiabilă care nu necesită confirmare prin alte teste. PCR este o abreviere pentru reacția în lanț a polimerazei. Principiul analizei se bazează pe detectarea ADN-ului chlamydia.

Este recomandabil să folosiți mai multe metode de diagnosticare

Analiza PCR are avantaje față de alte metode:

Reacția este foarte sensibilă - detectează cea mai mică particulă a agentului patogen.
Analiza PCR este o metodă rapidă de examinare. Analiza durează câteva ore, iar răspunsul este dat a doua zi.
Metoda vă permite să detectați direct agentul cauzal al bolii și nu reacția organismului după infecție. Acest avantaj vă permite să identificați agentul patogen chiar și în perioada de incubație a bolii, când o persoană nu are semne de infecție.
PCR este o metodă 100% specifică. Se bazează pe detectarea ADN-ului specific doar acestui agent patogen. ADN-ul (acidul dezoxiribonucleic) este formula (codul) lanțului genetic al tuturor ființelor vii de la un virus la un elefant. Fiecare creatură are propria sa catenă specifică de ADN.
Absența contraindicațiilor pentru formularea reacției.

Un complex de teste de laborator va ajuta la identificarea agentului patogen și a stadiului bolii

Metoda PCR are și câteva dezavantaje:

Analiza poate da un rezultat fals pozitiv dacă nu sunt respectate regulile de efectuare a analizei. Prin urmare, laboratorul PCR este dotat cu filtre de aer. Cerința de filtrare de laborator este de 99,9%.
PCR dă un răspuns fals negativ chiar și cu o imagine detaliată a bolii, dacă nu sunt respectate regulile de preluare a materialului.
Un rezultat pozitiv este posibil în cazul unei infecții trecute și vindecate, deoarece metoda detectează atât un agent patogen viu, cât și unul mort.

Medicul curant trebuie să interpreteze rezultatul. Dacă medicul se îndoiește de activitatea chlamydia cu un răspuns PCR pozitiv, el prescrie un ELISA (imunotest enzimatic). Metoda ELISA determină răspunsul imun, care specifică stadiul chlamidiei - un proces acut sau o infecție trecută.

Pregătirea pentru colectarea materialului pentru PCR la bărbați

Ce nu ar trebui să facă bărbații înainte de a face testul:

Cu 3 ore înainte de prelevarea de urină, nu puteți urina;
utilizați soluții pentru dezinfecție;
folosiți săpun antibacterian;
intimitatea este nedorită cu 36 de ore înainte de a lua materialul.

Pregătirea corectă este esențială pentru eliberarea unui rezultat PCR. Erorile din acest pas dau un rezultat fals pozitiv sau fals negativ.

Pentru un răspuns fiabil al analizei, este necesar să luați analiza corect. Înainte de a lua material pentru PCR, femeile nu ar trebui să:

urinați timp de 3 ore dacă analiza este luată din uretră;
nu utilizați săpun antibacterian;
supozitoarele vaginale, agenții lichizi antiinflamatori și dezinfectanți nu se folosesc cu 36 de ore înainte de a lua materialul;
contact sexual nedorit cu 36 de ore înainte de prelevare;
nu poți face duș;
faceți teste în timpul ciclului menstrual.

Pregătirea pentru test nu este deosebit de dificilă

Fiabilitatea rezultatului depinde de cât de corect este luat materialul, așa că medicul ar trebui să ia materialul pentru PCR. Specialistii de laborator considera momentul prelevarii materialului cel mai important pas in diagnostic.

Analiza PCR detectează ADN-ul chlamidiei. Pentru materialul de testat, bărbații iau secretul glandei prostatei, al spermatozoizilor sau al răzuirii din uretră. În unele cazuri, sângele este prelevat de la bărbați pentru PCR. La femei, un tampon sau răzuire este prelevat din uretră, vagin sau canalul cervical. Cu o cale sexuală de infecție, pentru a detecta chlamydia urogenitală, se ia o răzuire din organul bolnav, și nu un tampon pentru chlamydia. Pentru a clarifica diagnosticul de trahom, se ia o răzuire din conjunctiva ochilor.

La efectuarea PCR, se adaugă reactivi speciali în eprubete cu materialul și se plasează în dispozitiv. Metoda este efectuată de dispozitiv automat în modul specificat. Răspunsul rezultatului PCR arată pozitiv sau negativ. Dacă se găsește chlamydia în materialul de testat, se emite un răspuns pozitiv.

Nu există o singură metodă care să identifice cu acuratețe 100% chlamydia și faza de dezvoltare a procesului.

PCR - metoda experimentala de biochimie

Prin urmare, dacă chlamydia este detectată în analiza PCR, stadiul bolii ar trebui clarificat prin analiza ELISA. Interpretarea analizelor este efectuată de medic ținând cont de anamneză tablou clinic boli.

Indicații pentru PCR

Analiza PCR este prescrisă în astfel de cazuri:

infecție urogenitală acută, în care există o senzație de arsură, mâncărime, un miros modificat de secreții din organele genitale și disconfort la urinare. La bărbați, sângele apare la sfârșitul urinării.
Infecție prelungită a tractului urinar la femei - colpită, eroziune cervicală sau veruci genitale.
Modificări patologice în timpul sarcinii - antecedente obstetricale agravate.
Avorturi spontane și nașteri morti.
Infertilitate.

Analiza PCR este, de asemenea, prescrisă pentru a testa eficacitatea tratamentului antibacterian al chlamidiei, dar nu mai devreme de o lună mai târziu, din cauza posibilei primiri a unui rezultat fals pozitiv.

În concluzie, reamintim că chlamydia este cea mai frecventă infecție urogenitală cu transmitere sexuală. Boala este cauza infertilității feminine și masculine. Infecția afectează copiii în uter sau la naștere. În stadiul actual, o metodă fiabilă și specifică pentru diagnosticarea unei boli este analiza PCR. Pentru analiză, se folosește un frotiu sau, mai des, o răzuire a celulelor epiteliale, precum și sânge, sediment de urină sau material seminal. În unele cazuri, pentru a clarifica stadiul chlamidiei, metoda PCR este completată de analiza ELISA.

Vizualizări