Серологическое обследование на сифилис. Современные лабораторные методы и алгоритмы диагностики сифилиса. Важнейшие свойства, необходимые серологическим тестам - чувствительность, специфичность, воспроизводимость

1. Потекаев Н.Н., Фриго Н.В., Алмазова А.А., Лебедева Г.А. Эпидемиология сифилиса в современных условиях. Клиническая дерматология и венерология . 2015;1:22-34.
2. Plebani M, Carraro P. Mistakes in a stat laboratory: types and frequency. Clinical Chemistry. 1997;43:8:1348-1351.
3. Plebani M, Carraro P. Mistakes in a stat laboratory: 10 years later. Clinical Chemistry. 2007;53:7:1338-1342.
4. Lippi G, Chance JJ, Church S, et al. Preanalytical quality improvement: from dream to reality. Clin Chem Lab Med. 2011 Jul;49(7):1113-1126. doi: 10.1515/cclm.2011.600. epub 2011 apr 25. review.
5. Lippi G, Plebani M, Di Somma S, Cervellin G. Hemolyzed specimens: a major challenge for emergency departments and clinical laboratories. Crit Rev Clin Lab Sci. 2011 May-Jun;48(3):143-153. doi: 10.3109/10408363.2011.600228. review.
6. Plebani M, Sciacovelli L, Lippi G. Quality indicators for laboratory diagnostics: consensus is needed. Ann Clin Biochem . 2011 Sep;48(Pt 5):479. doi: 10.1258/acb.2011.011088. epub 2011 jul 6.
7. Zaninotto M, Tasinato A, Padoan A, Vecchiato G, Pinato A, Sciacovelli L, Plebani M. Effects of sample transportation on commonly requested laboratory tests. Clin Chem Lab Med . 2012 Oct 1;50(10):1755-1760. doi: 10.1515/cclm-2012-0150.
8. Пшеничная Л.А. Материалы к изучению возможности выпадения ложноположительных результатов реакции иммобилизации бледных трепонем при некоторых хронических заболеваниях несифилитической этиологии: Дис. ... канд. мед. наук. М. 1971.
9. Темиргалеев С.А. Биологически ложноположительные реакции на сифилис: Дис. ... канд. мед. наук. М. 1974.
10. Оловянишников О.В. Результаты массовых серологических обследований на сифилис и дифференциальная диагностика ложноположительных реакций: Дис. ... канд. мед. наук. Л. 1981.
11. Тацкая Л.С. Ложная позитивность серологических реакций на сифилис и ее диагностическая оценка . В кн.: Дерматология и венерология. Киев. 1991.
12. Орлова В.М., Сизякина Л.П., Досягаева Л.И. Причины ложноположительных результатов серологического исследования на ВИЧ-инфекцию. Клиническая лабораторная диагностика . 1993;3:44-47.
13. Garner MF. The biological false positive reaction to serological tests for syphilis. J Clin Pathol . 1970 Feb;23(1):31-34.
14. Gibowski M, Neumann E. Non-specific positive test results to syphilis in dermatological diseases. Br J Vener Dis . 1980 Feb;56(1):17-19.
15. Zhu WF, Lei SY, Li LJ. Hepatitis C virus infection and biological false-positive syphilis test: a single-center experience. Hepatobiliary Pancreat Dis Int . 2011 Aug;10(4):399-402.
16. Liu F, Liu LL, Guo XJ, et al. Characterization of the classical biological false-positive reaction in the serological test for syphilis in the modern era. Int Immunopharmacol . 2014 Jun;20(2):331-336. doi: 10.1016/j.intimp.2014.03.011. epub 2014 mar 29.
17. Guthe T, Ridet J, Vorst F, D’Costa J, Grab B. Methods for the surveillance of endemic treponematoses and sero-immunological investigations of «disappearing» disease. Bull World Health Organ . 1972;46(1):1-14.
18. Petersen CS. Biological false positive reactions in treponemal serological tests used to diagnose syphilis. Genitourin Med . 1986 Oct;62(5):356.
19. Cabrini JM, Bottasso OA, Margasin S, Schujman L, Mangiaterra L, Morini JC. Biological false positive test for syphilis in lepromatous leprosy patients with concomitant hepatitis B virus infection. J Investig Allergol Clin Immunol . 1991 Feb;1(1):45-48.
20. Nandwani R, Evans DT. Are you sure it’s syphilis? A review of false positive serology. Int J STD AIDS . 1995 Jul-Aug;6(4):241-248. Review.
21. Griemberg G, Ravelli MR, Etcheves PC, Orfus G, Pizzimenti MC. Syphilis and pregnancy. Prenatal control, seroprevalence and false biological positives. Medicina (B Aires) . 2000;60(3):343-347.
22. Фриго Н.В. C овременные критерии дифференциальной диагностики раннего скрытого сифилиса и ложноположительных результатов стандартных серологических реакций на сифилис: Дис. … д-ра мед. наук. М. 2001.
23. Приказ МЗ РФ №87 от 26.03.01 «О совершенствовании серологической диагностики сифилиса».
24. Müller F, Oelerich S. Correlations between immunological parameters and the stage of clinical apparent or latent syphilis. Dermatol Monatsschr . 1979 Jun;165(6):385-395.
25. Müller F. Immunological and laboratory aspects of treponematoses. Dermatol Monatsschr . 1984;170(6):357-366.
26. Liakhov VF, Borisenko KK, Potekaev NS, Borisova TK, Sidorova EV. The dynamics of Treponema-specific blood immunoglobulins in early forms of syphilis. Vestn Dermatol Venerol . 1990;(8):38-42.
27. Овчинников Н.М., Беднова В.Н., Делекторский В.В. Лабораторная диагностика заболеваний, передающихся половым путем. М. 1987.
28. Kannangai R, Kandathil AJ, Daniel HD, et al. An unusual seroconversion profile in a pregnant woman infected with the human immunodeficiency virus-1: need for using later generations HIV screening assays. Indian J Med Microbiol . 2008 Oct-Dec;26(4):390-392.
29. Contreras AM, Reta CB, Torres O, Celis A, Domínguez J. Safe blood in the absence of viral infections due to HBV, HCV and HIV in serological window period in donors. Salud Publica Mex . 2011;53 Suppl 1:S13-S18.
30. Beelar VP, Zimmerman HJ, Manchester B. Prozone phenomenon in the serodiagnosis of syphilis; a clinical study. Am J Med Sci . 1949 Jun;217(6):658-665.
31. Haslett P, Laverty M. The prozone phenomenon in syphilis associated with HIV infection. Arch Intern Med . 1994 Jul 25;154(14):1643-1644. No abstract available.
32. Taniguchi S, Osato K, Hamada T. The prozone phenomenon in secondary syphilis. Acta Derm Venereol. 1995 Mar;75(2):153-154.
33. Battistella M, Le Cleach L, Lacert A, Perrin P. Extensive nodular secondary syphilis with prozone phenomenon. Arch Dermatol . 2008 Aug;144(8):1078-1079.
34. Post JJ, Khor C, Furner V, Smith DE, Whybin LR, Robertson PW. Case report and evaluation of the frequency of the prozone phenomenon in syphilis serology - an infrequent but important laboratory phenomenon. Sex Health . 2012 Nov;9(5):488-490.
35. Liu LL, Lin LR, Tong ML, et al. Incidence and risk factors for the prozone phenomenon in serologic testing for syphilis in a large cohort. Clin Infect Dis . 2014 Aug;59(3):384-389.
36. Smith G, Holman RP. The prozone phenomenon with syphilis and HIV-1 co-infection. South Med J . 2004 Apr;97(4):379-382.
37. Park IU, Chow JM, Bolan G, Stanley M, Shieh J, Schapiro JM. Screening for syphilis with the treponemal immunoassay: analysis of discordant serology results and implications for clinical management. J Infect Dis . 2011 Nov;204(9):1297-1304.
38. Приказ Министерства Здравоохранения Российской Федерации N 291 от 30.07.01. «О мерах по предупреждению распространения инфекций, передаваемых половым путем».
39. Данилов С.И. Критерии диагностики, иммунокоррекция и реабилитация больных с серорезистентностью после лечения сифилиса: Дис. … д-ра мед. наук. СПб. 1998.

Непрямые методы диагностики сифилиса.

Для диагностики сифилиса применяется множество методов исследования, различающихся по технике проведения и предназначению. Прямые методы направлены на обнаружение возбудителя в исследуемом материале с помощью микроскопии (микроскопия в темном поле и др.) или ПЦР.

Помимо методов прямой детекции бледной трепонемы (T. pallidum), при обследовании на сифилис широкое применение получили непрямые (серологические ) методы исследования, выявляющие антитела к возбудителю сифилиса в сыворотке крови и цереброспинальной жидкости. К непрямым методам диагностики сифилиса относятся серологические реакции ИФА, РПГА, КСР, РИФ и РИФ-абс, РИБТ, ПЦР, экспресс-метод, иммуноблот и другие.

Серологические методы диагностики инфекционных заболеваний.

Серологические критерии диагностики основаны на специфических реакциях "антиген-антитело". Реагируют антигены (компоненты клеточных стенок, жгутиков, капсул, ДНК и токсинов) тех микроорганизмов, которые необходимо определить, с антителами , содержащимися в сыворотках. Между антигенами и соответствующими им антителами происходит связывание, что и положено в основу методов серологической диагностики. Серологические реакции применяются для определения неизвестного антигена (источником которого является бактерия, вирус, токсин и др.) с помощью известного антитела или для определения антитела в сыворотке с помощью известного антигена.

Серологические реакции классифицируют в зависимости от состояния антигена и особенностей среды, в которой взаимодействуют антиген и антитело, а также по способу проведения.

Для проведения серологических реакций испольуют множество лабораторных методов, таких, как агглютинация, преципитация, связывание комплемента, иммунофлуоресценция, иммуноферментный и радиоиммунный анализ и другие. Эти реакции позволяют эффективно проводить предварительную идентификацию микроорганизмов.

Сыворотки, которые необходимы для постановки серологических реакций, получают экспериментальным путем, в частности, их производят институты вакцин и сывороток, и предлагают в составе коммерческих диагностических наборов.

Серологические методы являются важным инструментом в диагностике и лечении инфекционных заболеваний человека и животных, поскольку с их помощью можно не только идентифицировать возбудителя заболевания, но и обнаружить в крови больных и переболевших специфические антитела к соответствующим возбудителям. Серологические методы в настоящее время являются самыми эффективными методами диагностики при невозможности или трудностях выделения возбудителя, и сравнительно редко дают ложноположительные и ложноотрицательные результаты.

Использование серологических методов для диагностики сифилиса

В основе серологических лабораторных методов диагностики сифилиса лежит способность организма давать иммунный ответ на появление возбудителя. С помощью серологических реакций в сыворотке (плазме) крови (или цереброспинальной жидкости) выявляют следы иммунного ответа на заражение, а именно антитела к антигенам бледной трепонемы, или же сами антигены.

Для того, чтобы установить специфический характер имеющихся клинических проявлений (т.е. что они являются следствием именно сифилиса) и, в дальнейшем, контролировать динамику патологического процесса, предложено большое количество серологических методов исследований. Эти же методы также широко применяют для скрининга населения.

В соответствии с действующими национальными руководствами и клиническими методическими рекомендациями, во многих странах мира при обследованиях населения с целью выявления больных сифилисом и при установлении клинического диагноза используются передовые серологические методы. Их применяют как при наличии клинических признаков болезни у пациентов, так и в латентные периоды.

Постановка серологических реакций - один из наиболее надежных методов диагностики сифилиса. Стандартизованные серологические реакции с регламентированной методикой постановки называются серологическими тестами на сифилис. Учитывая то, что почти все серологические реакции на сифилис в определенных условиях могут быть ложноположительными или ложноотрицательными , их следует ставить в комплексе и, при необходимости, в динамике.

Серологические реакции, которые используются для определения антител в сыворотке крови больного, отличаются друг от друга чувствительностью, специфичностью, сложностью постановки и стоимостью. Помимо классических методов, для эффективной серодиагностики сифилиса используются иммунологические тесты и технологии, получившие в 21 веке новый импульс к развитию.

Антитела выявляются различными иммунохимическими (серологическими) методами, среди которых осадочные реакции, иммуноферментный, иммунохемилюминесцентный, иммунохроматографический анализы, линейный иммуноблоттинг, исследование с применением проточной флюорометрии, технология иммуночипов и другие.

Серодиагностика (исследование с помощью серологических методов) применяется для:

• подтверждения клинического диагноза сифилиса,
• постановки диагноза скрытого сифилиса,
• контроля за эффективностью лечения, как один из критериев излеченности больных сифилисом,
• профилактики сифилиса (скрининговое обследование определенных групп населения с целью выявления патологии).

Важнейшие свойства, необходимые серологическим тестам - чувствительность, специфичность, воспроизводимость

Решающим критерием при выборе метода лабораторной диагностики является его эффективность - чувствительность, специфичность и воспроизводимость.

Чувствительность - это доля положительных результатов у больных. Чувствительность метода определяется процентом положительных результатов исследования проб, заведомо содержащих специфические маркеры возбудителя (нпр., антигены возбудителя или антитела к ним).

Специфичность - доля отрицательных результатов теста у здоровых пациентов. Специфичность метода определяется процентом отрицательных результатов исследования проб, заведомо не содержащих специфические маркеры возбудителя. Таким образом, чем выше чувствительность и специфичность, тем надежнее и достовернее метод исследования.

К важным диагностическим критериям также относится воспроизводимость результатов при повторных исследованиях одних и тех же проб. Следует отметить, что, несмотря на значительные достижения в области высоких технологий, не существует методов, обеспечивающих 100% (абсолютную) чувствительность и специфичность во всех исследуемых биопробах.

В настоящее время в России официально регистрируются тест-системы, наборы, ингредиенты, обладающие при постановке реакции менее 95% чувствительностью и специфичностью. Таким образом, всегда существует возможность получения неадекватного результата.

Классификация тестов по типу применяемого антигена. Трепонемные и нетрепонемные тесты на сифилис

В современной венерологии для диагностических целей используется более десятка вариантов серологических реакций на сифилис, которые можно подразделить по разным критериям на различные категории. Классификацию проводят по методологии проведения исследований, области применения, скорости, дешевизне, требованиям к лабораторной оснащенности и т.д.

Трепонемные реакции теоретически более специфичны, однако они также дают ложноположительные результаты. Более того, они не позволяют дифференцировать нелеченный и излеченный сифилис. Результаты трепонемных реакций будут положительными в обоих случаях. Нетрепонемные реакции позволяют различать нелеченную или недавно перенесенную и излеченную инфекцию.

При обследовании рекомендуется проводить и трепонемную, и нетрепонемную реакции. Для установки и подтверждения диагноза "сифилис" требуются положительные результаты при проведении тестов обоих типов - трепонемных и нетрепонемных. Поэтому нетрепонемные тесты применяются в комбинации с трепонемными тестами, и проводятся до начала, в процессе и после окончания лечения в определенные временные интервалы.

1. Нетрепонемные тесты

Наиболее известные из нетрепонемных тестов с визуальной расшифровкой результатов - это

• RW - реакция Вассермана с липидными антигенами (реакция связывания комплемента с кардиолипиновым антигеном, РСКк)
• реакция Канна (не используется в настоящее время),
• цитохолевая реакция Закс-Витебского (не используется в настоящее время),
• микрореакция преципитации с плазмой или инактивированной сывороткой (МРП или РМП),
• RPR (тест быстрых плазменных реагинов, Rapid Plasma reagin),
• TRUST (тест с толуидиновым красным и непрогретой сывороткой, Toluidin Red Unheated Serum Test).

Среди нетрепонемных тестов имеются 2 теста с микроскопическим считыванием результатов реакции:

1. VDRL - (Venereal Disease Research Laboratory);

2. USR - тест определения активных реагинов плазмы (Unheated Serum Reagins).

Реактивность в нетрепонемных тестах обычно указывает на повреждение тканей и не всегда специфична в отношении сифилиса. Простота выполнения и низкая стоимость позволяет использовать их как отборочные реакции при установлении предварительного диагноза сифилиса.

2. Трепонемные тесты

В трепонемных тестах используются специфические антигены трепонем. Эти тесты обязательны для подтверждения диагноза (РПГА, РИТ, РИФ и ИФА). Они являются более сложными и дорогостоящими, чем тесты 1-й группы, но и более специфичными и чувствительными. Выявление антител в спинно-мозговой жидкости также производится с помощью трепонемных тестов.

Традиционные трепонемные реакции, подтверждающие диагноз сифилиса, требуют дорогого лабораторного оборудования и опытного персонала, поэтому они редко проводятся вне специализированных лабораторий. Однако сейчас их можно заменить простыми и быстрыми трепонемными реакциями, которые возможно проводить на местах и в которых используется цельная кровь. Проведение этих реакций не требует длительного обучения, специальных условий для хранения реактивов и оборудования.

Сравнительная дешевизна, удобство и практичность трепонемных экспресс- реакций привлекают к ним внимание не только как к методам подтверждения диагноза. Эти реакции могут применяться для скрининга сифилиса в рамках оказания первичной медицинской помощи (их можно проводить на местах, в том же лечебно-профилактическом учреждении) или в районах, где лаборатории не доступны. Однако поскольку антитела к T. pallidum определяются на протяжении ряда лет независимо от того, лечился больной или нет, трепонемные экспресс-реакции нельзя использовать для оценки эффективности лечения и дифференциальной диагностики нелеченного и излеченного сифилиса.

Классификация серологических методов диагностики сифилиса по типу определяемых антител

В современной дерматовенерологии для диагностики используются различные серологические реакции на сифилис. Часть методов, которые были актуальны ещё десять лет назад, перестают применяться из-за сложности или недостаточной специфичности. В зависимости от выявляемых антител, методы серологической диагностики сифилиса подразделяются на три группы:

I. Липидные (реагиновые) реакции - определяются антитела к липидным антигенам (реагинам):

1) флокуляционные: микрореакция на стекле с липидными антигенами -экспресс-метод диагностики (микрореакции преципитации - МРП), VDRL, CMF (cardiolipin microflocculation test), RPR и др.;

2) реакция связывания комплемента (РСК) с липидными антигенами: реакция Вассермана (РВ), качественная и количественная методика постановки, термостатная и на холоде (реакция Колмера);

3) осадочные реакции, которые в настоящее время не используются: реакция преципитации Кана, цитохолевая реакция Закса - Витебского и др.;

II. Групповые трепонемные реакции - определяются антитела к групповым трепонемным антигенам (входящим в состав микробной клетки как патогенных, так и сапрофитных трепонем):

1) РСК с протеиновым антигеном Рейтера;

2) реакция иммунофлюоресценции (РИФ);

3) реакция иммунного прилипания (РИП).

III. Видоспецифичные протеиновые трепонемные реакции - определяются антитела к специфическим видовым антигенам Treponema pallidum:

1) реакция иммобилизации бледных трепонем (РИТ);

2) реакция иммунофлюоресценции РИФ-абс и ее варианты (IgM-FTA-ABS, 19S-IgM-FTA-ABS, и др.);

3) реакция непрямой гемагглютинации бледных трепонем (РПГА) и её модификация TPPA.

4) иммуноферментный анализ (ИФА);

5) иммуноблотинг.

Практическое использование серологических реакций на сифилис

Различные серологические реакции используются для разных практических целей.

За рубежом при массовых обследованиях населения и при необходимости экстренного выявления сифилиса используются нетрепонемные отборочные реакции (VDRL, RPR и др.). Для постановки диагноза требуется подтверждение в трепонемных тестах РИФ-Абс (FTA-ABS), РПГА или TPPA. В настоящее время, рекомендуется использовать ИФА, как замену VDRL в скрининговых тестах. Это связано с тем, что тест ИФА отличается чувствительностью, специфичностью, возможностью автоматизировать исследования, а также с разработкой диагностических тест-наборов. Кроме того, обосновывается реверсивная схема порядка исследования на сифилис, когда первыми используются трепонемные тесты.

С целью контроля за эффективностью терапии и для оценки активности инфекции рекомендуют VDRL в количественном исполнении. В качестве подтвердающего/дополнительного теста используется тест ИФА на противотрепонемные антитела IgM.

В отечественной практике используют комплекс серологических реакций (КСР), включающий реакцию микропреципитации (РМП) с кардиолипиновым антигеном и РСК с кардиолипиновым и трепонемным антигенами. В последнее время рекомендуется в КСР заменять РСК на ИФА или РПГА. Также используются РИФ (и ее модификации - РИФ-Абс и остальные), РИБТ.

РИБТ применяют в качестве реакции экспертизы в случаях расхождения трепонемных реакций.

Подходы к лабораторной серологической диагностике сифилиса в Российской Федерации

Внедрение в практику унифицированных методов клинических лабораторных исследований в СССР и Российской Федерации позволило ввести более прогрессивные диагностические методы, упорядочить работу клинико-диагностических лабораторий, повысить производительность труда, сократить дублирование лабораторных исследований и стало основой для разработки рациональных форм готовых наборов реактивов.

В 1985 году в СССР, в целях совершенствования диагностики сифилиса, нетрепонемная реакция РСК с неспецифическим (вассермановским) антигеном и осадочные реакции (цитохолевая и Кана) были исключены из диагностического комплекса, как менее чувствительные и не дающие дополнительной информации.

Вместо них, в составе комплекса серологических реакций на сифилис (КСР), было предусмотрено применение реакции связывания комплемента с трепонемным и кардиолипиновым антигенами (РСКт) и микрореакции преципитации с кардиолипиновым антигеном (РМП). Более высокая чувствительность и информативность этого комплекса реакций обеспечивала выявление не только реагинов, но и противотрепонемных антител.

1985 год

1. РМП с кардиолипиновым антигеном с плазмой крови и инактивированной сывороткой крови. Отборочный тест в случае изолированного применения.

2. РСК с трепонемным и кардиолипидовым антигенами; качественная и количественная методики постановки, термостатная и на холоде;

3. Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИТ); пробирочная и меланжерная методики постановки;

4. Реакция иммунофлюоресценции (РИФ) в следующих модификациях: РИФ с абсорбцией (РИФ-абс) с сывороткой крови и капиллярной кровью, РИФ-200, РИФ с цельной спинномозговой жидкостью (РИФ-ц); качественные и количественные методики постановки. Диагностика скрытых и поздних форм сифилиса, распознавание ЛПР (ложно-положительных результатов)

5. Комплекс классических серологических реакций (КСР): РСК (реакции Вассермана) с кардиолипиновым и трепонемным антигенами + РМП. Профилактическое обследование населения на сифилис, диагностика всех форм сифилиса, контроль эффективности лечения, обследование лиц, контактных по сифилису.

В 2001 году Минздравом РФ был утвержден новый нормативный документ, регламентирующий порядок проведения диагностических тестов - приказ Министерства Здравоохранения РФ №87 от 26 марта 2001 года «О совершенствовании серологической диагностики сифилиса» .

С целью совершенствования лабораторной диагностики сифилиса, повышения качества работы и предупреждения дальнейшего распространения заболеваемости сифилисом рекомендовано заменить РСК в комплексе серореакций (КСР) при диагностике сифилиса на ИФА и РПГА в качестве отборочных и подтверждающих тестов, т.к. эти тест-системы являются высокочувствительными, специфическими и воспроизводимыми.

Приказ №87 от 26 марта 2001 года «О совершенствовании серологической диагностики сифилиса» предусматривает применение для серо- и ликвородиагностики сифилиса в России следующих методов:

1. РМП и зарубежные аналоги (VDRL, RPR и аналогичные микрореакции) в качестве отборочных тестов при обследовании населения на сифилис. Постановка РМП осуществляется с плазмой или инактивированной сывороткой крови.
2. Иммуноферментный анализ (ИФА). Антиген из культуральных или патогенных бледных трепонем. Диагностические реакции, в том числе для ликвородиагностики. В связи с простотой постановки и наличием коммерческих тест-систем могут использоваться как отборочные тесты.
3. Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА). Антиген из культуральных или патогенных бледных трепонем. Отборочные и диагностические реакции.
4. Качественный и количественный варианты РИФ (РИФ-абс, РИФ-ц, РИФ с капиллярной кровью из пальца). Антиген - патогенная бледная трепонема штамма Никольса.
5. Комплекс серологических реакций (КСР) на сифилис, состоящий из реакции связывания комплемента (РСК) с трепонемным и кардиолипиновым антигенами, и РМП. Возможно заменить реакцию связывания комплемента на ИФА или РПГА также в сочетании с РМП. КСР относится к диагностическим тестам.
6. Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ), в которой в качестве антигена используют патогенные бледные трепонемы штамма Никольса. РИБТ относятся к диагностическим подтверждающим тестам.

Таким образом, последовательность обследования пациентов на сифилис в учреждениях здравоохранения рекомендуется планировать следующим образом:

1. При первичном обследовании производится постановка отборочной (скрининговой) реакции микропреципитации (РМП) или ее модификации (RPR, TRUST, VDRL) в количественном и качественном вариантах и в случае положительного результата - любого специфического подтверждающего трепонемного теста (РПГА, ИФА, КСР, РИФ, РИТ);

2. После окончания терапии ставится РМП или ее модификация и по снижению титра судят о динамике инфекционного процесса и эффективности терапии. Подтверждением эффективности проведенной терапии считается снижение титра в 4 и более раз в течение 1 года.

Прием по предварительной записи! Суббота, воскресенье.

Данный тест предложил иммунолог из Германии А. Вассерман, и он был назван в его честь – реакция Вассермана, или RW. Основные его достоинства – дешевизна, простота, быстрый результат.

На ЭДС кровь сдается в период скринингов, то есть массовых обследований, для определения заболеваний у здоровых, на первый взгляд, людей, у которых отсутствуют какие-либо тревожные симптомы. В настоящее время такой тест считается устаревшим и заменяется другими, но до сих пор, когда речь идет о нетрепонемном обнаружении сифилиса, применяется такое выражение - «сдать кровь на RW».

Описание анализа крови ЭДС и его назначение

Анализ крови на ЭДС сдается не только теми пациентами, которые подозревают, что у них есть заболевание, либо намереваются подтвердить уже поставленный диагноз, но и в обязательном порядке донорами крови и беременными женщинами. Терапия сифилиса может осуществляться посредством применения антибиотиков, но невылеченное заболевание перерастает в хроническую форму, поражающую все органы человеческого организма, а также характеризуется постоянными ремиссиями и рецидивами.

Проводят тест в следующих случаях:

• Если имеется подозрение на заболевание сифилисом.
• Для подтверждения диагноза - скрытого сифилиса.
• В случае необходимости проверки доноров.
• Тесты при беременности.
• Скрининг.

Сколько времени делается анализ крови на ЭДС? Этот тест очень оперативный. Уже через полчаса можно анализировать результат.

Переносчик

В качестве переносчика сифилиса выступает заболевший пациент и жидкости его тела. Возможно заражение половым путем, через кровь либо посредством применения предметов личной гигиены. Обычно причиной заболевания становятся беспорядочные сексуальные контакты. Чем раньше будет диагностирована патология, тем быстрее и проще становится лечение. Чтобы пройти тест, можно просто сдать натощак кровь. Если не требуются никакие другие анализы, кроме ЭДС, то нужно лишь не употреблять пищевые продукты в течение восьми часов. За день до проведения анализа соблюдать специальную диету не требуется. Обычно кровь берется из вены, однако возможно и из пальца, поскольку не нужно большое ее количество. Что это - ЭДС (анализ крови)? Рассмотрим подробнее.

Если обнаружены антитела

При обнаружении антител можно судить о проникновении инфекции в организм человека в определенной степени. Принимающий участие в тесте кардиолипин является таким веществом, которое извлекается из бычьего сердца. Особый кардиолипиновый раствор соединяется с небольшим количеством крови в стеклянных лунках. Полученный раствор оценивается через полчаса на количество получившегося осадка.

Необходимо помнить о возможных погрешностях. Положительный результат не всегда говорит о том, что пациент болен. Хотя тест является достаточно эффективным, он в любом случае нуждается в подтверждении другими анализами, поэтому кровь нужно сдать несколько раз. Особенно это относится к беременным женщинам. Кроме определения диагноза, данный тест дает возможность выявления стадии заболевания от первой до четвертой. Лечение назначается на основе полученных сведений.

Не все знают, что это - анализ крови на ЭДС.

Расшифровка анализа на сифилис и показатели нормы

При процедуре ЭДС затруднительно говорить об определенной норме или ее нарушениях. Результат в этом случае либо отрицательный, либо положительный. Но помимо этого существуют еще и титры, которые показывают, в каком количестве присутствуют антитела в крови. Каждый конкретный результат расшифровывать должен специалист. Имеется большое количество различных тонкостей, в связи с чем не нужно делать преждевременные выводы и пытаться самостоятельно расшифровать анализ или найти ответ на вопрос, что это такое - анализ крови на ЭДС - с помощью интернета.

Классовая принадлежность клеток lgM или lgG

Указывается классовая принадлежность клеток lgM или lgG: при попадании в организм трепонемы иммунная система начинает бурно реагировать на проникновение инородных клеток. Сначала формируются такие антитела, как lgM. Обнаружить их можно уже через неделю после того, как человек заразился. lgG же появляются в организме приблизительно через месяц и способны сохраняться в нем на протяжении длительного периода, даже если болезнь была успешно вылечена. Присутствие данного класса может служить указанием того, что в организме была выработана устойчивая реакция иммунитета к бледной трепонеме.

При отрицательном результате и указанных при этом титрах со словом lgG рядом с ними можно судить о вторичном характере сифилиса. То есть в крови имеются антитела к бледной трепонеме, однако это антитела памяти, способные долго циркулировать в организме уже после выздоровления пациента. Подобный анализ в некоторых случаях может быть положительным, хотя на самом деле он ложноположительный. Для точного определения требуется учет всех предыдущих результатов исследований и наблюдение за уменьшением титра. Все последующие анализы при этом могут продолжать давать положительный результат.

Расшифровку анализа крови на ЭДС должен проводить высококвалифицированный специалист.

Как определить степень поражения?

Он может давать как положительный, так и отрицательный результат. Поражение тем серьезнее, чем большее количество плюсов имеется в показателях.

• слабоположительная реакция - + и ++ (если плюс один, то результат является сомнительным);
• положительная - +++;
• резко положительная - ++++.

По результатам анализа указываются титры антител. При проведении исследования для контроля терапии титры позволяют определить, выздоравливает ли пациент. Как правило, больной после лечения находится под наблюдением специалистов на протяжении года. За этот период он несколько раз проходит тестирование. Об эффективности терапии также свидетельствует снижение титров за год в четыре и более раз. При отсутствии иммуноглобулинов IgM в крови можно говорить об отсутствии возобновления инфекции. Присутствие же IgG возможно в течение длительного времени после лечения, а порой даже всю жизнь.

Что это? Нужно помнить о том, что у этого метода есть определенные недостатки. Исследование назначается для того, чтобы подтвердить подозрения, однако на достоверный результат рассчитывать можно далеко не во всех случаях.

Реакция Вассермана способна иметь положительные показатели не только при сифилисе, но и при малярии, волчанке, туберкулезе. К сожалению, более эффективный и точный метод все еще отсутствует. Зачастую такой анализ проводится одновременно с остальными для более полной картины. У беременных женщин результат может оказаться положительным даже при отсутствии каких-либо патологий. Он способен стать ложным также во время менструации. Сколько делается анализ крови на ЭДС, лучше узнать заранее.

Перепроверить тест

При получении положительного результата необходимо перепроверить его несколько раз. Пациент имеет право сдавать другие тесты и требовать подтверждения, поскольку ЭДС не является надежным на 100 %. Если же появляются язвы, шанкры, при этом они не болят и не кровоточат, можно судить о том, что произошло заражение. Нужно сразу же обратиться к специалисту. Пациент должен узнать все подробности терапии, действие и состав назначенных препаратов.

При беременности возможно профилактическое лечение, и от него не нужно отказываться. Если женщина до беременности лечилась от сифилиса (либо на ранних ее сроках), врач может назначить профилактический медикаментозный курс. Также пациент имеет право требовать абсолютной анонимности. О диагнозах и терапии врач распространяться не может.

Не нужно откладывать лечение, поскольку на начальных этапах оно происходит быстрее. Необходимо отказаться от жирных и тяжелых продуктов, алкоголя и всего, что может осложнить процесс выздоровления.

Мы рассмотрели ЭДС - анализ крови. Что это, теперь понятно.

Экспресс-тест на сифилис: достоинства диагностики, показания, как подготовиться и показания к проведению

Сифилис - довольно опасная патология, возникновение которой провоцируется проникновением в организм бледной трепонемы (Treponema pallidum). Заболевание опасное и при несвоевременной терапии или игнорировании проявлений, чревато критическими последствиями, в том числе летальным исходом.

Терапия венерического недуга продолжительная и трудоемкая. Своевременное выявление недуга и целесообразное лечение - оптимальный способ предупреждения развития осложнений, улучшения общего состояния и самочувствия. Прогноз будет благоприятным только в случае выявления сифилиса на ранних стадиях.

Патология коварна, характеризуется медленным и прогрессирующим течением. Обнаруживается зачастую случайно при прохождении обследования при подозрении на иной недуг, и поэтому зачастую выявляется поздно.

Поздние стадии болезни чреваты необратимыми и тяжелыми поражениями не только внутренних органов и систем, но и ЦНС. Человек может на протяжении длительного периода даже не догадываться о наличии заболевания и заражать партнеров. Риск инфицирования при интимной близости с зараженным - 30-35%. Продолжительность скрытого течения составляет примерно 1,5 месяца. Симптоматика недуга разнообразна и изменяется с прогрессированием патологии.

При появлении первой тревожной симптоматики - твердого шанкра на кожных покровах, необходимо в незамедлительном порядке обратиться за помощью специалиста и пройти обследование.

Не стоит пытаться самостоятельно вылечить недуг, это чревато непредсказуемыми последствию и чаще приводит к развитию осложнений. Сегодня существует много препаратов для терапии болезни, а также методов определения наличия в организме трепонем. Диагностирование патологии заключается в изучении анамнеза жизни, осмотре пациента, сборе анализов (биологического материала) и дальнейшего исследования жидкостей, в том числе крови, проведении серодиагностики. Также проводят дополнительные лабораторные исследования мочи, крови и биохимии крови.

Самый популярный и весьма эффективный способ - экспресс-тест на сифилис. Действие теста схоже по принципу с тестом на беременность. Единственное отличие - вместо урины используется кровь.

Достоинства метода исследования

Способ выявления сифилиса и его возбудителя пользуется спросом и в отличие от остальных методик обладает рядом преимуществ.

К основным из них относят:

1. Быстрый результат. Практически любой экспресс тест на сифилис дает результат в течение получаса. В некоторых случаях результата придется ждать несколько часов, но это все равно быстрее, чем исследование материала в лабораториях.
2. Цену. Приспособление в среднем стоит 300 рублей, что в разы дешевле диагностики в условиях лаборатории.
3. Возможность приобрести, как в любой аптеке, так и интернет магазине (анонимно).
4. Возможность проведения самостоятельно, в домашних условиях.
5. Простоту и доступность. Для прохождения теста не нужно особых знаний и умений. Все что нужно сделать - ознакомиться с аннотацией и при прохождении теста придерживаться всех рекомендаций.
6. Анонимность. Для проведения исследования нет надобности в посещении медучреждения. Не нужно оставлять контактную информацию.

Показания

Провести исследование может каждый желающий.

Но чаще всего проведение экспресс-теста на сифилис рекомендовано:

• во время вынашивания плода;
• в случае возникновения тревожной симптоматики;
• при отсутствии возможности диагностирования в медучреждении;
• людям, которые часто меняют половых партнеров;
• тем, кто страдает иными половыми инфекциями;
• перед тем, как сдать кровь (донорство);
• при близком бытовом контакте с зараженным;
• людям, которые по каким-то причинам не пользуются методами контрацепции;
• если был незащищенный половой контакт.

Подготовительный этап и порядок выполнения исследования

С целью получения достоверного результата, экспресс-тест на сифилис следует проводить с учетом нескольких правил.

1. Категорически не рекомендуется за один-два дня до исследования пить спиртные напитки.
2. За тридцать минут до анализа следует отказаться от курения.
3. Тест необходимо проводить натощак и предпочтительно до обеда.
4. Перед проведением необходимо тщательно изучить инструкцию.

Несоблюдение этих рекомендаций чревато искажением результата. Проводится тест очень просто. Никакими особыми навыками и умениями обладать не нужно. Для начала следует хорошо вымыть руки (желательно мылом, обладающим антибактериальными свойствами). Нельзя проводить процедуру, если тест был только что куплен, и он еще не нагрелся до комнатной температуры (зимой, к примеру). Вскрывать упаковку следует только после окончания подготовки.

Чтобы полоска, которая уже извлечена, лежала на горизонтальной и ровной поверхности. К тому же она должна быть чистая и сухая.

Перед исследованием палец протирают спиртовой салфеткой (ее внутренней стороной). После прокола верхней фаланги скарификатором, каплю крови, которая выступит, следует набрать в пипетку и выдавить в ячейку индикатора. Далее в ячейку добавляется реагент - пара капель. Приблизительно по истечении четверти часа можно узнать результат. Если результат появился на индикаторе позднее (более чем через полчаса), считать его верным не рекомендовано.

Принцип работы

Работа теста схожа по принципу с тестом для определения беременности. Только вместо урины используется кровь. Результат будет зависеть от вида приспособления и правильности проведения процедуры.

Анализ крови РПГА: виды и эффективность тестов, достоверность результата и стоимость

Различают несколько разновидностей тестов. Они могут быть трепонемными и нетрепонемными. Первые являются очень специфическими, потому отсеивание здоровых людей происходит тщательно. Единственный их недостаток - пониженная чувствительность на ранних стадиях.

Анализ крови РПГА (расшифровывается аббревиатура, как реакция пассивной гемагглютинации) - специфический тест. Заключается метод в склеивании красных кровяных телец, на поверхности которых скапливаются антигены возбудителя. Подобная реакция происходит при добавлении крови инфицированного, которая содержит антитела к спирохете.

Что касательно чувствительности анализа крови РПГА и подобных тестов, в частности РИФ, то на ранних стадиях она составляет порядка 70-80%, на более поздних - 99%.

Анализ крови РПГА - далеко не единственный качественный метод, позволяющий определить болезнь. Не менее эффективным является ИФА. При помощи иммуноферментного анализа можно выявить антиген и антитела к ним, возбудителей самых разных инфекционных недугов. ИФА - это и скрининговый и подтверждающий способ одновременно. Этот метод способствует выявлению любой половой инфекции, а также сифилис на любом этапе его развития.

Применение нетрепонемных тестов

Помимо трепонемных тестов, в частности анализа крови РПГА выделяют еще и нетрепонемные. Такие приспособления способствуют обнаружению в сыворотке антител к фосфолипидам, разрушающимся из-за недуга. Подобные приспособления стоят дешевле, чем трепонемные. Для их проведения используется не белок-антиген (являющийся специфическим для трепонемы), а его альтернатива (кардиолипиновый антиген).

Из-за высокой чувствительности результат исследований часто ложноположительный. Применение таких тестов рекомендовано при массовом скрининге населения. Если же возбудитель выявлен, проводится повторная проверка, но уже с применением трепонемного теста.

Характеристики самых эффективных тестов

Сегодня существует много тестов для определения венерической патологии.

К самым точным и проверенным относят следующие виды:

1. Креатив МП-сифилис. Высокоэффективный и чувствительный тест (99%) с наличием двойной комбинации антигенов. Определяет антитела к возбудителю сифилиса, как в крови, так плазме и сыворотке. Для проведения исследования используется пара капель цельной крови. Результат можно узнать по истечении десяти минут. О наличии в организме трепонем будет сигнализировать появление двух розово-фиолетовых полос. Если в области контроля есть только одна полоска - человек здоров.
2. Cito Test Syphilis. Этот тест является иммунохроматографическим. Оснащен тест кассетой, буфером, пипеткой. Все остальное нужно докупить. Примерно через десять минут после анализа можно узнать результат. Наличие двух четких линий сигнализирует о наличии патологии.
3. ИммуноХром - антиТР-Экспресс. Выявляет антитела к возбудителю сифилиса. Результат можно узнать по истечении четверти часа. Об инфицировании сигнализирует появление двух фиолетовых полосок. В комплект входят: буфер, спиртовые салфетки, пипетка, тест полоска, скарификатор.
4. Сифилис-тест. Набор реагентов способствует определению антител к трепонеме способом ИХА (иммунохроматографического анализа). Наличие двух параллельных полос свидетельствует о наличии сифилиса. Результат можно узнать через десять минут.
5. Профитест. Тест с чувствительностью в 99.5%. В комплекте: тест кассета, ланцет, пипетка, спиртовые салфетки. Результат будет известен по истечении четверти часа. Наличие двух полос сигнализирует об инфицировании.

Зачастую результаты исследований точные. Ложным или недостоверным результат может быть из-за неправильного проведения процедуры.

Экспресс-диагностика сифилиса

Когда-то реакция Вассермана считалась самым точным исследованием, определявшим наличие трепонемы в крови. Сейчас этот метод используется все реже, потому что на смену ему пришли более современные реакции, чувствительные к определению антител к трепонеме на первых неделях заражения. Одно из таких эффективных исследований крови или сыворотки – экспресс-диагностика сифилиса. Метод эффективен как для первичного обследования при подозрении на наличие венерического заболевания, так и для выявления вируса у доноров или у беременных женщин, для пациентов прошедших лечение и для больных со скрытой формой заболевания.

В зарубежных клиниках экспресс-диагностика сифилиса имеет название Rapid Plasma Reagin. Еще чаще встречается сокращенное обозначение теста RPR. При заражении организма трепонемой в крови формируются защитные антитела класса IgG и IgM, которые готовы противостоять тому липопротеиноподобному материалу, который образуется в клетках и тканях организма, пораженных трепонемой. Этот тест относится к нетрепонемным, потому что он направлен не на выявление вируса, а на точное определение количества антител в крови. ЭДС позволяет установить точный срок заболевания.

ЭДС является серологическим тестом. Его можно сдать в любой клинике. При желании пациент может пройти анонимное обследование крови на сифилис с выдачей результатов анализа без указания фамилии. Сдав анализы, ожидать результаты диагностики придется недолго. Исследование крови длится примерно полчаса, но выдается ответ в руки на вторые сутки.

Для исследования на сифилис берется небольшое количество крови из вены. Обязательным условием получения верного ответа является посещение клиники пациентом натощак. Для обнаружения антител при экспресс-диагностике сифилиса кровь смешивается с кардиолипиновым раствором. Тестирование схоже с реакцией преципитации. На специальной стеклянной пластине происходит реакция, которая выявляет антитела. В результате на стекле появляется осадок и хлопья. По ним ставят диагноз, который выражается в плюсах. Как и в реакции Вассермана, 4 + свидетельствуют о точном присутствии трепонемы и антител в организме. Однако метод экспресс-диагностики сифилиса может давать и ложные результаты, когда в организме есть антитела, вызванные другими заболеваниями. Для подтверждения положительного результата с небольшим количеством + необходимо сдать еще и трепонемный тест.

Лабораторная диагностика сифилиса

Микроскопическое исследование

Пункция регионарных лимфатических узлов

Серологическая диагностика

Реакция Вассермана (РВ)

Обычно РВ ставится с двумя или тремя антигенами. Наиболее часто применяется отличающийся высокой чувствительностью кардиолипиновый антиген (экстракт из сердца быка, обогащенный холестерином и лецитином) и трепонемный антиген (обработанная ультразвуком взвесь анатогенных культуральных бледных трепонем). Совместно с реагинами сыворотки крови больного эти антигены образуют иммунный комплекс, способный адсорбировать и связывать комплемент. Для визуального определения образованного комплекса (реагины + антиген + комплемент) в качестве индикатора применяется гемолитическая система (смесь эритроцитов барана с гемолитической сывороткой). Если комплемент связан в 1 фазе реакции (реагины + антиген + комплемент), гемолиз не наступает - эритроциты выпадают в легко заметный осадок (РВ положительная). Если в 1 фазе комплемент не связан вследствие отсутствия в испытуемой сыворотке реагинов, он будет использован гемолитической системой и произойдет гемолиз (РВ отрицательная). Степень выраженности гемолиза при постановке РВ оценивается плюсами: полное отсутствие гемолиза ++++ или 4+ (РВ резкоположительная); едва начавшийся гемолиз +++ или 3+ (РВ положительная); значительный гемолиз ++ или 2+ (РВ слабоположительная); непонятная картина гемолиза ± (РВ сомнительная); полный гемолиз - (реакция Вассермана отрицательная).

Помимо качественной оценки РВ имеется количественная постановка с различными разведениями сыворотки (1:10, 1:20, 1:80, 1:160, 1:320). Титр реагинов определяется максимальным разведением, еще дающим резко положительный (4+) результат. Количественная постановка РВ имеет значение в диагностике некоторых клинических форм сифилитической инфекции, а также при проведении контроля за эффективностью лечения. В настоящее время реакция Вассермана ставится с двумя антигенами (кардиолипиновый и трепонемный озвученный штамм Рейтера). Как правило, РВ становится положительной на 5-6 неделе после заражения у 25-60% больных, на 7-8 неделе - у 75-96%, на 9-19 неделе - у 100%, хотя в последние годы иногда раньше или позже. При этом, титр реагинов постепенно нарастает и достигает максимальной величины (1:160-1:320 и выше) в случае появления генерализованных высыпаний (сифилис вторичный свежий). При позитивации РВ выставляется диагноз первичного серопозитивного сифилиса.

При вторичном свежем и вторичном рецидивном сифилисе РВ положительная у 100% больных, но у истощенных больных с ослабленным иммунитетом может наблюдаться отрицательный результат. Впоследствии титр реагинов постепенно понижается и при вторичном рецидивном сифилисе обычно не превышает 1:80-1:120.

При третичном сифилисе РВ положительная у 65-70% больных и обычно наблюдается низкий титр реагинов (1:20-1:40). При поздних формах сифилиса (сифилис внутренних органов, нервной системы) положительная РВ наблюдается в 50-80% случаев. Титр реагинов колеблется от 1:5 до 1:320.

При скрытом сифилисе положительная РВ отмечается у 100% больных. Титр реагинов от 1:80 до 1:640, а при позднем скрытом сифилисе от 1:10 до 1:20. Быстрое снижение титра реагинов (вплоть до полной негативации) во время лечения свидетельствует об эффективности лечения.

Недостатки реакции Вассермана - недостаточная чувствительность (в начальной стадии первичного сифилиса отрицательная). Она негативная также у 1/3 больных, если они в прошлом лечились антибиотиками, у пациентов третичным активным сифилисом с поражениями кожи и слизистых, костно-суставного аппарата, внутренних органов, центральной нервной системы, при позднем врожденном сифилисе.

Недостаточная специфичность - реакция Вассермана может быть положительная у лиц, которые ранее не болели и не болеют сифилисом. В частности ложноположительные (неспецифические) результаты РВ отмечаются у больных, которые страдают системной красной волчанкой, лепрой, малярией, злокачественными новообразованиями, поражениями печени, обширными инфарктами миокарда и другими заболеваниями, а иногда у совершенно здоровых людей.

Кратковременная ложноположительная реакция Вассермана выявляется у некоторых женщин перед родами или после них, у лиц, злоупотребляющих наркотиками, после наркоза, приема алкоголя. Как правило, ложноположительная РВ выражена слабо, чаще с низким титром реагинов (1:5-1:20), положительная (3+) или слабо положительная (2+). При массовых серологических обследованиях частота ложноположительных результатов составляет 0,1-0,15%. Для преодоления недостаточной чувствительности, пользуются постановкой на холоде (реакция Колляра) и одновременно она ставится с другими серологическими реакциями.

Осадочные реакции Кана и Закса-Витебского

Преимущество - быстрота получения ответа (черезмин). Результаты оцениваются по количеству выпавшего осадка и величины хлопьев. Выраженность определяют как КСР - 4+, 3+, 2+ и отрицательная. Следует отметить, что ложноположительные результаты наблюдаются чаще, чем при РВ. Как правило, экспресс-метод применяется при массовых обследованиях на сифилис, при обследовании в клинико-диагностических лабораториях, соматических отделениях и больницах. На основании результатов экспресс-метода диагноз сифилиса выставлять запрещается, исключается его применение у беременных, доноров, а также для контроля после лечения.

Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ)

РИБТ имеет значение при дифференциальной диагностике для отграничения ложноположительных серологических реакций от реакций, обусловленных сифилисом. Поздно становится положительной чем РВ, РИФ и поэтому для диагностики заразных форм сифилиса ее не применяют, хотя во вторичном периоде сифилиса она положительная у% больных.

В третичном периоде сифилиса с поражением внутренних органов, опорно-двигательного аппарата, нервной системы РИБТ положительная в% случаев (РВ часто отрицательная).

Необходимо помнить, что РИБТ может оказаться ложноположительной в случае наличия в исследуемой сыворотке трепонемоцидных препаратов (пенициллин, тетрациклин, макролиты и др.), которые вызывают неспецифическую иммобилизацию бледных трепонем. С этой целью кровь на РИБТ исследуется не ранее 2 недель после окончания приема антибиотиков и других лекарственных средств.

РИБТ как и РИФ в процессе лечения медленно негативируются, поэтому она не применяется в качестве контроля в процессе лечения.

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)

Результаты РИФ учитываются по интенсивности свечения бледных трепонем в препарате (желто-зеленое свечение). При отсутствии противотрепонемных антител в сыворотке, бледные трепонемы не определяются. При наличии антител выявляется свечение бледных трепонем, степень которого выражается в плюсах: 0 и 1+ - отрицательная реакция; от 2+ до 4+ - положительная.

РИФ относится к групповым трепонемным реакциям и ставится в разведении исследуемой сыворотки в 10 и 200 раз (РИФ-10 и РИФ-200). РИФ-10 считается более чувствительной, однако часто выпадают неспецифические положительные результаты, чем при постановке РИФ-200 (отличается более высокой специфичностью). Как правило, РИФ становится положительной раньше, чем РВ - положительная при первичном серонегативном сифилисе у 80% больных, у 100% во вторичном периоде сифилиса, всегда положительная при скрытом сифилисе и в% случаев при поздних формах и врожденном сифилисе.

Специфичность РИФ повышается после предварительной обработки исследуемой сыворотки сорбентом-ультраозвученным трепонемным антигеном, который связывает групповые антитела (РИФ - абс).

Показания к постановке РИБТ и РИФ - диагностика скрытого сифилиса для подтверждения специфичности комплекса липидных реакций в случае предположения сифилитической инфекции на основании положительной РВ. Положительные РИБТ и РИФ являются доказательством латентного сифилиса. При ложноположительной РВ при различных болезнях (системная красная волчанка, злокачественные новообразования и др.) и если повторные результаты РИБТ и РИФ отрицательные, это свидетельствует о неспецифическом характере РВ. Подозрение на поздние сифилитические поражения внутренних органов, опорно-двигательного аппарата, нервной системы при наличии у больных отрицательной РВ. Подозрение на первичный серонегативный сифилис, когда у пациентов при многократных исследованиях отделяемого с поверхности эрозии (язвы), при пунктате из увеличенных регионарных лимфатических узлов бледная трепонема не обнаруживается - в этом случае ставится только РИФ - 10.

При обследовании лиц с отрицательной РВ, которые имели длительные половые и бытовые контакты с больными сифилисом, учитывая вероятную возможность лечения их в недавнем прошлом противосифилитическими препаратами, вызвавшими негативацию РВ. Иммуноферментный анализ (ИФА, ELISA - enzymelinked immunosorbent assay) - метод разработан E.Engvall и соавт., S.Avrames (1971). Сущность состоит в соединении сифилитического антигена, сорбированного на поверхности твердофазного носителя с антителом исследуемой сыворотки крови и выявлении специфического комплекса антиген-антитело при помощи меченной ферментом антивидовой иммунной сыворотки крови. Это позволяет оценивать результаты ИФА визуально по степени изменения окраски субстрата под действием фермента, входящего в состав конъюгата. Недостоверные результаты ИФА могут возникать в результате недостаточного разведения инградиентов, нарушения температурного и временного режимов, несоответствии рН растворов, загрязнении лабораторной посуды, неправильной технике промывки носителя.

Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА)

Техника взятия крови для серологических реакций

Для исследования на экспресс-метод кровь берегся из кончика пальца, как это делается при ее взятии на СОЭ, но берут кровь на 1 капилляр больше. Экспресс-метод можно также ставить с сывороткой крови, полученной при помощи венопункции. Если возникает необходимость исследования крови в отдаленных лабораториях, вместо крови можно пересылать сухую сыворотку (метод сухой капли). Для этого на следующий день после взятия крови, сыворотку отделяют от сгустка и набирают в стерильный шприц в количестве 1 мл. Затем сыворотку выливают в виде 2 отдельных кружков на полоску плотной писчей бумаги (вощаная бумага или целлофан) размером 6×8 см. На свободном крае бумаги пишется фамилия, инициалы обследуемого и дата забора крови. Бумагу с сывороткой защищают от прямых солнечных лучей и оставляют при комнатной температуре до следующего дня. Сыворотка засыхает в виде небольших кружочков блестящей желтоватой стекловидной пленки. После этого, полоски бумаги с высушенной сывороткой свертывают как аптечный порошок и отсылают в лабораторию, указывая диагноз и с какой целью исследуется.

Серологическая резистентность

Псевдорезистентность - после проведенного лечения несмотря на положительные серологические реакции бледная трепонема в организме отсутствует. Антигена в организме нет, но продолжается выработка антител, которые фиксируются при постановке серологических реакций.

Серологическая резистентность может развиваться вследствие:

• неполноценного лечения без учета давности и стадии заболевания;
• недостаточной дозы и в частности из-за неучета массы тела пациентов;
• нарушения интервала между введением препаратов;
• сохранения в организме бледных трепонем несмотря на проведенное полноценное специфическое лечение, из-за их стойкости к пенициллину и другим химиопрепаратам в случае наличия скрытых, осумкованных очагов поражения во внутренних органах, нервной системе, лимфатических узлах, которые малодоступны для антибактериальных препаратов (нередко бледные трепонемы обнаруживаются в тканях рубца через много лет после окончания терапии, в лимфатических узлах иногда удается обнаружить бледные трепонемы через 3-5 лет после противосифилитической терапии);
• снижения защитных сил при различных заболеваниях и интоксикациях (эндокринопатии, алкоголизм, наркомания и др.);
• общего истощения (приемом пищи бедной витаминами, белками, жирами).

Кроме этого, нередко выявляется ложная позитивация серологических реакций, не связанная с наличие у больных сифилиса и вызванная:

• сопутствующими неспецифическими заболеваниями внутренних органов, нарушениями сердечнососудистой системы, ревматизмом, дисфункциями эндокринной и нервной систем, тяжелыми хроническими дерматозами, злокачественными новообразованиями;
• поражениями нервной системы (тяжелые травмы, сотрясение головного мозга, психические травмы);
• беременностью; хроническими интоксикациями алкоголем, никотином наркотиками; инфекционными болезнями (малярия, туберкулез, вирусный гепатит, дизентерия, сыпной, брюшной и возвратный тифы).

Указанные факторы могут оказывать влияние на иммунологическую реактивность организма как в период активного развития сифилитических проявлений, так и во время их регресса.

Анализ ЭДС: описание, назначение и расшифровка анализа на сифилис

ЭДС, или экспресс диагностика сифилиса, имеет несколько названий. Она известна, как реакция Вассермана или как антикардиолипиновый тест. Это один из самых популярных и эффективных тестов для определения бледной трепонемы, возбудителя такого заболевания, как сифилис.

Описание и назначение анализа крови ЭДС

Анализ крови на сифилис: подготовка и назначение

Анализ ЭДС сдают не только те, кто подозревает у себя это заболевание или хочет подтвердить уже известный диагноз, но и все доноры крови, а также беременные женщины в обязательном порядке. Сифилис можно вылечить при помощи антибиотиков, однако непролеченный сифилис перетекает в хроническую форму, которая поражает все органы в теле человека, а также протекает в виде постоянных рецидивов и ремиссий.

Переносчиком сифилиса является заболевший человек, жидкости его тела. Заразиться можно через кровь, половым путем или же через средства личной гигиены. Чаще всего причиной является беспорядочная половая жизнь. Чем раньше будет обнаружена болезнь, тем проще и быстрее можно будет ее вылечить.

Для того, чтобы пройти тест, достаточно сдать кровь натощак. Если кроме ЭДС никаких анализов больше сдавать не нужно, требуется только не принимать пищу в течение 8 часов. Соблюдать особую диету за день до сдачи крови не нужно. Как правило, кровь сдают из вены, но можно брать из пальца, так как большого количества крови не требуется.

Суть анализа ЭДС заключается в выявлении антител к бледной трепонеме в крови пациента.

Если антитела обнаружены, значит, инфекция попадала в организм в той или иной мере. Кардиолипин, участвующий в тесте, представляет собой вещество, извлекаемое из бычьего сердца. Специальный кардиолипиновый раствор смешивается с небольшим количеством крови пациента в стеклянных лунках. Через 30 минут полученный раствор оценивают на количество образовавшегося осадка.

Стоит помнить о погрешностях. Не всегда положительный результат означает, что человек болен. Несмотря на эффективность теста, его всегда нужно подтверждать другими анализами, сдавать кровь несколько раз. Особенно это касается беременных женщин. Помимо постановки диагноза, тест позволяет определить стадию от 1 до 4. Лечение назначается с учетом всех данных.

Расшифровка и норма анализа на сифилис

Анализ ЭДС: расшифровка показателей

В случае с ЭДС трудно говорить о какой-либо норме или отклонении от нормы. Результат либо положительный, либо отрицательный. Однако помимо этого указывают еще и титры, показывающие, в каком количестве в крови присутствуют антитела.

Расшифровать каждый конкретный результат может только врач. Существует множество тонкостей, поэтому не стоит делать поспешных выводов, а также пытаться расшифровать анализ самому или через интернет.

Указывается класс клеток lgG или lgM:

• Как только трепонема попадает в организм, начинается бурная реакция иммунной системы на вторжение инородных клеток.
• Первым делом формируются антитела lgM. Их можно обнаружить через неделю после заражения.
• Антитела lgG появляются примерно через месяц и могут сохраняться долгое время даже после успешного лечения болезни. Наличие класса lgG может указывать лишь на то, что организм выработал устойчивую иммунную реакцию к бледной трепонеме.
• Если в результате стоит слово «отрицательный», но титры указаны и рядом находится слово lgG, это может означать, что сифилис вторичный. То есть антитела к бледной трепонеме в крови присутствуют, но это так называемые антитела памяти, которые могут долгое время циркулировать в крови уже после выздоровления.

Такой анализ иногда дает даже положительный результат, который на самом деле является ложноположительным. Чтобы определить это, нужно учитывать все предыдущие результаты анализов и следить за снижением титра. При этом все дальнейшие анализы могут оставаться положительными.

Больше информации об анализе на сифилис можно узнать из видео.

Рядом с различными буквами и титрами можно увидеть плюсы:

• Если стоит минус, значит результат отрицательный
• Если один плюс, то сомнительный
• Два плюса – слабоположительный
• Три плюса – положительный
• Четыре плюса – резко положительный

Помимо ЭДС можно сдать и другие анализы - РИФ, проводимая с помощью люминесцентного микроскопа, или РПГА, основанная на склеивании эритроцитов.

Стоит учитывать все результаты. Если все они положительные, значит сифилис есть. Если положительный только один, велика вероятность ложноположительного результата. При наличии двух положительных результатов назначают дополнительную проверку.

Положительный результат анализа крови ЭДС

Действие при положительном результате анализа

Необходимо помнить, что ЭДС анализ имеет свои недостатки. Назначение анализа заключается в подтверждении подозрений, но не всегда можно рассчитывать на достоверный результат.

Реакция Вассермана может быть положительной не только при сифилисе, но и при туберкулезе, волчанке, малярии. К сожалению более точного и эффективного метода пока нет. Часто этот анализ сдают вместе со всеми остальными, чтобы увидеть картину целиком. У беременных результат может быть положительным без наличия каких-либо заболеваний. Даже при месячных можно получить ложноположительный результат.

Тем, кто получил положительный результат ЭДС, следует придерживаться следующих рекомендаций:

1. Необходимо несколько раз перепроверить результаты анализа. Пациент имеет право потребовать подтверждения, сдать другие тесты, поскольку надежность ЭДС анализа не 100%.
2. Если помимо анализа стали появляться шанкры, язвы, но они еще не кровоточат и не болят, это признак заражения. Необходимо срочно обратиться к врачу.
3. Пациент имеет право узнать все подробности лечения, а также состав и действие препаратов, с помощью которых будет проводиться лечение.
4. Во время беременности могут назначит профилактическое лечение, от которого не стоит отказываться. Врач назначает профилактические курсы препаратов, если женщина лечилась от сифилиса до беременности или во время беременности на ранних сроках.
5. Пациент вправе потребовать полную анонимность. Врачебная тайна запрещает распространятся о диагнозах и лечении. В случае несоблюдения анонимности, лечебное учреждение привлекается к административной ответственности.
6. Не стоит затягивать с лечением. На начальных стадиях лечение проходит быстро.

По ходу лечения нужно будет сдавать анализ ЭДС несколько раз. Скорее всего его придется сдавать неоднократно на протяжении всей жизни, причем довольно долго он может оставаться ложноположительным.

Только врач может сделать вывод, когда пациент становится незаразным и его можно снять с учета (обычно при наличии одного плюса в анализе). На время лечения нужно отказаться от алкоголя, тяжелой и жирной пищи, а также всего, что осложнит выздоровление. Отрицательный результат ЭДС станет свидетельством отсутствия заболевания, рекомендуется повторять исследование ежегодно.

Заметили ошибку? Выделите ее и нажмите Ctrl+Enter, чтобы сообщить нам.

Экспресс-тест на сифилис

Диагностика сифилиса включает в себя:

• Изучение анамнеза жизни и заболевания.
• Клинический осмотр пациента.
• Исследование материала с пораженных участков (лимфатические узлы, ликвор, амниотическая жидкость) на предмет обнаружения бледной трепонемы.
• Проведение серодиагностики (нетрепонемные и трепонемные тесты).
• Проведение дополнительных лабораторных исследований (общий анализ крови и мочи, биохимия крови и др.).

Нетрепонемные тесты позволяют обнаружить в сыворотке крови антитела к фосфолипидам, которые разрушаются вследствие данного заболевания.

К нетрепонемным тестам относятся:

• Антикардиолипиновый тест (тест быстрых плазменных реагинов, RPR, экспресс-тест на сифилис).
• Реакция связывания комплемента с кардиолипиновым антигеном (реакция Вассермана).
• Микроскопический тест.

Реакцию Вассермана можно проводить также с трепонемным антигеном. Поэтому в зависимости от того, какой материал используется в реакции, данное исследование можно отнести, как к трепонемным, так и к нетрепонемным.

Описание и принцип действия антикардиолипинового теста (RPR).

Возбудителем сифилиса является Treponema palidum. Данный возбудитель имеет несколько чужеродных для организма человека антигенов, которые по строению аналогичны кардиолипину. Иммунная система пациента реагирует на кардиолипиновые антигены выработкой специфических антител класса IgG и IgM.

Данный экспресс-тест на сифилис относится к числу нетрепонемных. Исследование позволяет выявить антифосфолипидные антитела в крови больных первичным сифилисом в 75% случаях. На стадии вторичного сифилиса результат анализа положительный в 100% обследованных. Наиболее эффективным принято считать проведение теста спустя неделю после образования сифилитической язвы или через 3- 5 недель после заражения.

Проведение данного метода диагностики актуально для скрининга при беременности и для обследования полового партнера. Также, тест используют для оценки эффективности назначенного лечения. После адекватно проведенной терапии результат антикардиолипинового теста становится отрицательным.

В связи с тем, что тест относится к ряду неспецифических возможно развитие ложноположительного результата. Это обусловлено тем, что данные антитела могут быть выявлены при ряде других инфекций, вызванных бледной трепонемой.

При условии, если результат данного метода диагностики показал положительные результаты, то рекомендуется проконсультироваться с врачом (дерматовенерологом) и провести повторное исследование, используя специфический трепонемный тест.

Исследование следует проводить натощак. Пациента ставят в известность, что на протяжении 8 часов до проведения анализа противопоказано употреблять продукты питания. С утра можно выпить стакан воды.

На сегодняшний день сдать анализы на сифилис можно в медицинских учреждениях как государственного, так и частного типа. Исследования на сифилис в лабораториях любого типа должны проводиться анонимно.

Для экспресс теста на сифилис используют антиген, в состав которого входит кардиолипин, лецитин и холестерин, а также кровь пациента. Для лучшей визуализации результата исследования используют частицы угля. При положительном результате в сыворотке образуются черного цвета флокулянты.

При титре от 1:2 до 1:320 и выше результат экспресс-теста для подтверждения диагноз сифилис принято считать положительным.

Отрицательным считают результат при полном отсутствии антител. Сомнительная реакция - низкие титры антител.

Также, в аптеке можно купить набор теста на сифилис для использования в домашних условиях.

Анализ крови РПГА: подготовка к сдаче и анализ полученных результатов

Более достоверными тестами для диагностики заболевания принято считать исследования, при помощи которых можно обнаружить специфические антигены возбудителя заболевания или комплексы антиген-антитело.

К числу таких трепонемных тестов относятся:

• Реакция иммунофлюресценции (РИФ).
• Реакция пассивной агглютинации (РПГА).
• Иммуноферментный анализ (ИФА).
• Реакция иммобилизации Treponema palidum.
• Иммуноблодинг.

Что такое анализ крови РПГА?

При помощи данного исследования удается выявить агглютинацию тех эритроцитов, на поверхности которых были зафиксированы антигены возбудителя сифилиса. Анализ следует проводить в комплексе с тестом быстрых плазменных реагинов.

Это обусловлено тем, что при одиночном проведении анализа крови на сифилис методом РПГА возможно развитие отрицательного результата исследования в первые 4 недели после заражения, при первичном сифилисе и при скрытом течении заболевания.

Подготовка пациента к сдаче анализа:

1. Исследование показано проводить натощак.
2. Следует ограничить прием жидкости (вечером и утром можно выпить по стакану простой воды).
3. Анализ рекомендовано сдавать впервой половине дня.
4. На протяжении 30 минут строго противопоказано курить.
5. Недопустимо содержание в крови алкоголя.

В случае не соблюдения всех вышеуказанных рекомендаций возрастает риск развития ложноположительных результатов.

На сегодняшний день, данный метод исследования постепенно вытесняют более современные и высокочувствительные (экспресс методы, РПГА и т. д.). Но, тем не менее, в странах СНГ его еще используют в качестве скринингового исследования.

Расшифровка данных анализа крови на RW:

В случае резко положительного результата исследования титр составляет от 1:2 до 1:800.

Экспресс-анализ на сифилис, цена

Экспресс-анализ на сифилис основан на выявлении в крови больных антифосфолипидных антител. Экспресс-метод диагностики сифилиса (RPR) относится к разряду неспецифических серологических тестов. Метод RPR является прототипом реакции Вассермана (RW), он довольно чувствителен и дает позитивный результат через сразу после появления первичного шанкра (соответствует термину 3 – 5 недель после инфицирования). Экспресс-анализ на сифилис является эффективным в 90% случаев для первичного сифилиса и в 100% – для вторичного.

Существует серологическая нетрепонемная и трепонемная диагностика. Трепонемные тесты являются основными, с их помощью выявляется возбудитель заболевания.

Экспресс анализ крови на сифилис является нетрепонемным или неспецифическим тестом. И, тем не менее, данный метод прост, удобен и позволяет сдать анализ на сифилис быстро. Результаты его готов в этот же день!

Когда назначается экспресс-тест на сифилис?

• положительной симптоматике;
• во время беременности;
• перед донорской сдачей крови;
• перед трансплантацией органов;
• после случайного сексуального акта;
• при беспорядочной половой жизни;
• перед операцией;
• детям, рожденным от больных матерей;
• после бытового контакта с человеком, у которого имеется бледная трепонема;
• при смене партнера.

Подготовка к сдаче экспресс-анализа на сифилис

Экспресс-анализ на сифилис не нуждается в предварительной подготовке!

Как проводят анализ?

1. Специально обученный медицинский персонал берет у пациента кровь из вены (не менее 5 мл).
2. Затем в лабораторных условиях производят осаждение эритроцитов и лейкоцитов, после чего в сыворотку крови добавляется кардиолипиновый антиген.
3. Если через определенный интервал времени в сыворотке крови выпадает темный осадок, в ней имеются антифосфолипидные антитела, формирующие комплекс антиген-антитело. Результат в таком случае считается положительным.

Преимущества

Экспресс-диагностика сифилиса имеет ряд преимуществ:

• быстрота проведения (результат готов в этот же день);
• анонимность;
• возможность регулярного контроля лечения.

Результаты и расшифровка экспресс-анализа на сифилис

Отрицательный результат экспресс-анализа на сифилис бывает в случаях, когда:

1. Человек не болен.
2. Если болезнь находится на стадии инкубации, т.е. когда 3 – 5 недель с момента инфицирования еще не прошли, а антитела к кардиолипину еще не выработались. В таком случае необходимо сделать контрольный тест через 2 недели.
3. Поздняя стадия. После вторичной стадии концентрация антител существенно снижается.

Ложноположительный результат теста RPR на сифилис бывает при следующих случаях:

• Наличие серьезных заболеваний (корь, пневмония, диабет, опухоли, туберкулез, заболевания аутоиммунного генеза, гепатит вирусной этиологии и др.);
• Беременность;
• Алкоголизм;
• Недавняя вакцинация в анамнезе;
• Наркозависимость.

Положительный результат экспресс-анализа на сифилис должен подтвердиться дополнительной полной диагностикой. Врач проводит комплексы полных исследований. Если все они дают также положительный результат, то речь действительно идет о заболевании и требуется лечение сифилиса.

Эффективность

Экспресс-анализ крови на сифилис RPR является качественным методом диагностики и может использоваться в большинстве случаев подозрений на бледную трепонему. Если результат теста положительный, пациент должен пройти обязательное обследование у дерматовенеролога и повторно сдать кровь на специфическое исследование (трепонемное).

К основным специфическим методам диагностики сифилиса относят:

В нашей клинике вы сможете сдать кровь на сифилис экспресс-методом RPR и получить результаты в тот же день!

Кроме того мы выполняем все анализы, направленные на диагностику сифилиса, в этой связи диагноз будет поставлен точно!

Ставиться на совокупности данных анамнеза,конфронтации,клинической картины и лабораторных данных,включающих обнаружение возбудителя и результатов серологического обследования.Подтверждение диагноза лабораторными данными обязательно.

Методы диагностики,подтверждающие наличие сифилиcа

Наименование	Метод проведение	Подтверждающие признаки
	Распрос больного	Подтвержденный диагноз сифилиса у полового партнера Случайная половая связь без барьерного предохранения в период,соответствующий инкубационному периоду Наличие в прошлом высыпаний в области половых органов,увеличения лимфоузлов
Клинический осмотр	Осмотр половых органов,кожных покровов,слизистой рта,ануса Пальпация высыпных элементов при их наличии Пальпация периферических лимоузлов	Наличие характерных для различных периодов сифилиса поражений кожи и слизистых. Увеличение лимфоузлов
Обнаружение T.pallidum в материале из очагов поражения,лимфатических узлов,амниотической жидкости,ликвора		Обнаружение типичных форм трепонемы
		Обнаружение специфической ДНК T.pallidum
Реакция связывания комплимента (Реакция Вассермана)

Методы диагностики, подтверждающие наличие различных форм и осложнений сифилиса

Наименование	Формы и осложнения
Исследование ликвора	Нейросифилис
Ренгенография аорты длинных трубчатых костей грудины костей черепа суставов	Ранний врожденный сифилис Поздний врожденный сифилис Третичный сифилис
Сурдологическое обследование	Неврит слухового нерва Сифилитический лабиринтит
Офтальмологическое обследование	Неврит зрительного нерва Паренхиматозный кератит

Также применяются и рутинные методы исследования - общие анализы крови и мочи,биохимический анализ крови и.т.д.

Что такое серологическая диагностика сифилиса

В большинстве случаев обнаружить возбудителя сифилиса невозможно или обнаружение
его затруднительно.Поэтому для диагностики сифилиса применяют так называемое серологическую диагностику,основанную на определении различных видов и классов антител,которые организм выработал с целью своей защиты от сифилитической инфекции т.е определяется не возбудитель инфекции,а как организм прореагировал на его появление.
Серологическое исследование (от от лат. serum - сыворотка) представляет собой лабораторный анализ плазмы каппилярной или венозной крови основаный на иммунологической реакции антиген-антитело.
В качестве антигенов используют фабрично изготовленные препараты,аналогичные по своей структуре антигенам липидов,появляющихся в организме при разрушении тканей бледной спирохетой,липидам ее мембран и специфическим молекулярным соединениям,входящих в состав мебраны бледной спирохеты (для этих целей используются очищенные и ультраозвученные штаммы трепонем или выделенные от них рекомбинантные антигены).
В лабораторных условиях к антигенам добавляется сыворотка крови обследуемого.Если в сыворотке (плазме) крови присутствуют антитела происходит реакция антиген-антитело и ее результаты обнаруживаются различными методами (положительный результат) при отсутствии антител реакция не происходит (отрицательный результат).Серологическую диагностику сифилиса осуществляют в следующих случаях.

Скрининг на сифилис

Массовое обследование определенных групп населения.Для скрининга применяются дешевые,простые и быстрые по исполнению тест системы,основанные на нетрепонемных тестах.Скринингу на сифилис подвергаются:

• Беременные женщины
• Доноры крови и органов для трансплантации
• Некоторые профессиональные контингенты (работники питания,образования,здравоохранения)
• Военнослужащие
• Лица,отбывающие наказание в местах лишения свободы
• Больные,готовящиеся к оперативному хирургическому вмешательству
• Лица,поступившие на стационарное лечение (обязательная вассерманизация - в России,странах СНГ и некоторых других странах)

Диагностика сифилиса

Для диагностики сифилиса применяются комбинация нетрепонемных и трепонемных тестов на сифилис или только трепонемные (подтверждающие) реакции.Серологическое обследование на сифилис назначается в следущих случаях:

• Лицам,имеющих клинические признаки сифилиса
• Лицам с любыми генитальными язвами
• Лицам - половым партнерам больных сифилисом,а также в случае близкого бытового контакта с больным вторичным сифилисом
• Детям,родившимся от больных сифилисом матерей
• Лицам с подтвержденным диагнозом других половых инфекций
• Для подтверждения результатов скрининга (отборочных реакций)

Контроль за лечением сифилиса

Применяются нетрепонемные тесты,так трепонемные тесты остаются положительными продолжительное время после лечения,а иногда всю жизнь.

Что такое нетрепонемные тесты

Нетрепонемные тесты определяют антитела класса IgG и IgM к липидам(фосфолипидам),
липопротеинам, высвобождаемых из поврежденных клеток хозяина, вследствии сифилитической инфекции и липидам,входящим в состав мембраны бледной трепонемы. Антилипидные антитела могут появляться не только вследствие сифилиса или других трепонематозов , но и в ответ на на некоторые острые и хронические заболевания, при которых наблюдается разрушение тканей.Антилипидные антитела (реагины) образуются через 7-14 дней после образования шанкра или через 4-5 недель после инфицирования.В основном нетрепонемные тесты применяются в двух случаях:

• Нетрепонемные тесты, в связи с дешевизной,доступностью простотой и быстрым сроком исполнения, применяются для скрининга сифилиса как отборочные реакции.
• По изменению количественных нетрепонемных тестов судят о степени эффективности лечения сифилиса и устанавливают его излеченность.Поэтому нетрепонемные тесты применяются в комбинации с трепонемными тестами для установки диагноза сифилиса и проводятся до начала лечения,в процессе лечения и после окончания лечения в определенные временные интервалы.

В качестве антигена для проведения нетрепонемных тестов используется стандартный кардиолипин-лецитин -холестероловый антиген (который является одним из компонентов тканей человеческого организма и содержит липиды, характерные для бледной трепонемы) для проведения микрореакции преципитации,в случае определения реагинов реакцией связывания комплимента(реакции Вассермана),помимо кардиолипинового антигена применяют еще и ультразвуковой дезинтеграт культуральных трепонем (трепонемный антиген).К нетрепонемный тестам относят:

• RPR (Rapid Plasma Reagins) тест быстрых реагинов (российский аналог микрореакция преципитации МР)
• VDRL (Venereal Disease Research laboratory)
• Реакция связывания комплимента (реакция Вассермана)

Недостатки нетрепонемных тестов

• Ложноотрицательные результаты - при исследовании неразведенных образцов сыворотки, содержащих большое количество антител,за счет так называемого феномена прозоны. Это явление может наблюдаться на ранних стадиях сифилиса и у пациентов с сопутствующей ВИЧ-инфекцией.
• Недостаточная чувствительность для диагностики поздней стадии сифилиса
• Ложноположительные результаты (биологические ложноположительные реакции) при наличии других острых или хронических заболеваний.

Что такое трепонемные тесты

Как и при нетрепонемных тестах при проведении трепонемных тестов используется иммунологическая реакция антиген-антитела.Но в качестве антигенов применяются трепонемные антигены - либо интактные трепонемы либо очищенные и ультраозвученные трепонемы либо рекомбинантные антигены.Для проведения и обнаружения результатов реакции антиген-антитела используют более сложные и дорогие различные методы.Наиболее часто используются следующие трепонемные тесты.

• Реакция иммунофлюоресценции (РИФ -FTA) в различный модификациях
• Реакция пассивной агглютинации (РПГА - TPHA)
• Иммуноферментный анализ (ИФА -EIA) в том числе рекомбинатный ИФА
• Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ)
• Иммуноблотинг

Что такое иммуноблотинг

Иммуноблотинг (Western blot) для определения специфических IgM либо IgG является одним из современных и точных методов диагностики сифилиса.При проведении иммуноблотинга T.pallidum подвергаются электрофорезу, в результате чего происходит разделение белковых иммунодетерминант. Затем проводится обработка разделенных точек - blots исследуемой сывороткой и антителами к IgG либо IgM, помеченных ферментами или радиоактивными веществами. Выявленные с помощью иммуноблотинга определенные иммунодетерминанты являются диагностическими признаками сифилиса.
IgG-иммуноблотинг (IgG Western blot)по чувствительности и специфичности соответствует РИФ-абс.IgM -иммуноблотинг (IgM Western blot) применяется как диагностический тест при врожденном сифилисе.

Какая динамика серологических реакций при сифилисе

Антилипидные (неспецифические) антитела образуются через 7-14 дней после образования шанкра или через 4-5 недель после инфицирования.Специфические противотрепонемных антител класса IgM,обнаруживатся в конце второй недели заболевания. IgG к трепонемным антигенам появляются приблизительно через 4 недели после начала заболевания.К моменту появления клинических симптомов сифилиса в сыворотке крови пациентов можно выявить как специфические IgM, так и специфические IgG (суммарные антитела).Параметры иммунного ответа могут изменяться в результате проводимого лечения.Адекватное лечение раннего сифилиса приводит к быстрому снижению титров неспецифических антител и специфических IgM, при этом специфические IgG обычно сохраняются в сыворотке крови в течение длительного периода времени,а иногда и всю жизнь.

Сроки появления положительных серологических реакций при сифилисе

Частота положительных результатов серореакций при разных стадиях сифилиса

Test	Первичный	Вторичный	Скрытый	Третичный

Как интерпретировать тесты на сифилис

В мировой медицинской практике для диагностики сифилиса используют три реакции: нетрепонемный тест - RPR или VDRL и два трепонемных тестов - реакцию иммунофлюоресценции (РИФ-FTA) и реакцию пассивной гемоагглютинации (РПГА - TPHA)

			Интерпретация
			нет сифилиса или инкубационный период или очень ранняя стадия
			нелеченый или недавно леченый сифилис
			первичный сифилис или ложноположительные РПР и РИФ
			ложноположительные РПР и РПГА или ложноотрицательная РИФ
			леченый сифилис или нелеченый поздний сифилис
			биологическая ложноположительная реакция
			ранний первичный сифилис или недавно леченый сифилис или ложноположительная РИФ
			пролеченый сифилис или ложноположительная РПГА

В России для диагностики сифилиса еще применяют реакцию связывания комплимента (реакцию Вассермана) и реакцию иммобилизации бледных трепонем (РИБТ)

Первичный сифилис

При первичном серонегативном периоде сифилиса бывают положительные РИФ и Ig ИФА как наиболее чувствительные серореакции. Однако это не является основанием для постановки таким больным диагноза первичного серопозитивного сифилиса.У ряда больных в этом периоде бывает изолированный положительный результат при постановке реакции Вассермана с трепонемными или с кардиолипиновым антигенами. В конце 3-й или в течение 4-й недели после появления шанкра становятся положительными стандартные серологические реакции - с этого момента начинается первичный серопозитивный период сифилиса. На 1-2-й неделе первичного серопозитивного сифилиса отмечается увеличение степени позитивности серореакции (1+, 2+, 3+) и нарастание титра реагинов (1:5, 1:10, 1:20). РИФ и ИФА уже у всех больных дают резко положительный результат, но РИБТ, как правило, отрицательная или процент иммобилизации очень низок. Диагноз первичного серопозитивного сифилиса ставится и тем больным, у которых осадочные реакции и реакция Вассермана с неспецифическими антигенами дали даже однократный слабоположительный результат. При дальнейшем течении первичного сифилиса все серологические реакции становятся резко положительными (4+); титр реагинов достигает 1:80, 1:160, РИФ продолжает быть резко положительной, но РИБТ у большинства больных еще остается отрицательной или может стать слабоположительной.

Вторичный сифилис

При вторичном свежем сифилисе резко положительный результат по всем стандартным серологическим реакциям наблюдается почти в 100% наблюдений; титр реагинов наиболее высок - 1:160; 1:240 или 1:320. РИФ - 4+; РИБТ дает положительнй результат более чем у половины больных, однако процент иммобилизации трепонем невысок (40-60%).
При вторичном рецидивном сифилисе положительный результат по стандартным серологическим реакциям отмечается в 96-98% наблюдений. Отрицательные результаты могут иногда объясняться малосимптомным рецидивным течением, наличием астенизации и сочетанием сифилиса и ВИЧ-инфекции. РИБТ дает положительный результат у 85-90% больных при выраженной степени иммобилизации - 80-90-100%.

Третичный сифилис

Третичный сифилис характеризуется положительными результатами по стандартным серологическим реакциям в 50-90% наблюдений и положительной РИБТ у 92-100% пациентов с высоким процентом иммобилизации.

Скрытый сифилис

Диагноз скрытого серопозитивного сифилиса, как указывалось выше, устанавливают только по положительным серореакциям в крови с обязательным подтверждением их по РИБТ, так как только РИБТ (и в меньшей степени РИФ) позволяет отдифференцировать ложноположительные серореакции (даже с позитивностью в 2+ или 3+) от истинно положительных.

Нейросифилис и висцеральный сифилис

Разные формы сифилиса нервной системы и висцерального сифилиса имеют различную частоту и выразительность стандартных серореакции. Так, прогрессивный паралич в 100% случаев сопровождается резко положительными всеми стандартными серологическими реакциями. Сифилис сосудов мозга, спинная сухотка, сифилитическое поражение сердечно-сосудистой системы сопровождаются положительными серореакциями лишь в 40-50-60% наблюдений. Однако РИБТ почти при всех перечисленных патологических состояниях дает резко положительный результат (90-100% иммобилизации).

Врожденный сифилис

При диагностировании врожденного сифилиса в первые 2 мес после рождения стандартные серологические реакции у ребенка не определяют, т. к. они могут быть положительными за счет пассивной передачи реагинов через плаценту. По этой же причине не имеет значение и положительный результат РИБТ. Пассивно переданные от матери ребенку имобилизины самопроизвольно исчезают в течение 6 мес после рождения. Если ребенок инфицируется незадолго до родов, то в этом случае РИБТ будет еще отрицательной (в связи с более поздним образованием иммобилизинов), несмотря на наличие в организме ребенка сифилитической инфекции.
При врожденном сифилисе детей грудного возраста с активными проявлениями стандартные серореакции могут быть отрицательными в 1% наблюдений.При врожденном сифилисе раннего детского возраста отрицательные стандартные серореакции варьируют от 15 до 20%, но в этих случаях РИБТ дает положительные данные у 90-98% детей.При позднем врожденном сифилисе даже при наличии активных проявлений стандартные серореакции констатируются лишь у 70-80% обследованных, но зато РИБТ четко положительная у 100% больных с высоким титром иммобилизинов.

Положительные серореакции при отсутствии симптомов сифилиса

Это самый сложный вопрос в сифилидологии - положительные серореакции на сифилис при отсутствии клинических симптомов.
Различают пять ситуаций

Скрытый сифилис

• нетрепонемные тесты (МР -RPR,VDRL) - положительные (хотя при позднем скрытом сифилисе - давность заболевания более 2 лет -могут быть отрицательные)
• нет документированного свидетельства о полученном адекватном лечении сифилиса

Рекомендации - проведении лечения скрытого сифилиса по существующим инструкциям

Серопозитивность после лечения сифилиса

• нетрепонемные тесты (МР -RPR,VDRL) - положительные,отмечается снижение титров в течении года в 4 и более раза

Рекомендации:Если контрольные тесты не проводились - назначается количественный нетрепонемный тест (МР) в течении года с интервалом в 3 месяца

Серорезистентность после лечения сифилиса

• трепонемные тесты (РПГА,РИФ,ИФА с трепонемным антигеном) положительные или отрицательные - значения не имеет
• нетрепонемные тесты (МР -RPR,VDRL) - положительные,отмечается их стабильность или снижение титров в течении года менее чем в 4 раза
• есть документированное свидетельство о полученном адекватном лечении сифилиса

Рекомендации:Дополнительное лечение сифилиса

Излеченный сифилис

• трепонемные тесты (РПГА,РИФ,ИФА с трепонемным антигеном) положительные
• нетрепонемные тесты (МР -RPR,VDRL) - отрицательные
• есть документированное свидетельство о полученном адекватном лечении сифилиса

Рекомендации:Снятие с учета

Если нет документированного свидетельства о полученном адекватном лечении сифилиса в прошлом см.ситуация №1 или дополнительно:
-исключить ранний сифилис (серонегатив)- контрольный трепонемный и нетрепонемный тест через 2 недели
-исключить поздний скрытый сифилис - исследование ликвора,клинико-рентгенологическое исследование
-исключить ложноположительный трепонемный тест (провести 2-3 трепонемных теста,включая РИБТ) в динамике
-исключить невенерический трепанематоз
-провести лечение позднего скрытого сифилиса по существующим методикам.

Ложноположительные реакции на сифилис

• трепонемные тесты (РПГА,РИФ,ИФА с трепонемным антигеном) отрицательные
• нетрепонемные тесты (МР -RPR,VDRL) - положительные
• наличие документированных свидетельств о полученном адекватном лечении сифилиса не имеет значения



• The value of darkfield microscopy in the differential diagnosis of secondary syphilis (Calif West Med. 1926) Full text
• Результаты сравнительного изучения диагностической эффективности ряда современных нетрепонемных и трепонемных тестов
• Laboratory diagnosis and interpretation of tests for syphilis (Clin Microbiol Rev. 1995)

В России улучшается год от года. Однако ежегодно на тестированиях выявляют тысячи заболевших людей. Обследования на эту болезнь проводят и перед беременностью, и перед любой плановой госпитализацией. Кроме того, ежегодно представители многих профессий проходят диспансеризацию, при которой, кроме всего прочего, нужно сдать анализы на сифилис. И, разумеется, без этого анализа для человека будет закрыта карьера государственного служащего, врача, да и просто вакансии вроде учителей, поваров, воспитателей.

Современная медицина знает множество способов обнаружить бледную трепонему, которая является возбудителем болезни, в крови человека. Эти методы разделяют на несколько больших групп:

1. В первой группе исследований - тесты, при которых в биоматериале ищут присутствие трепонемы. Для этого на исследования забирают материал из язв или пораженных болезнью органов.
2. Вторая, серологическая группа методов позволяет выявить косвенные следы присутствия трепонемы в организме. Здесь подразумеваются антитела, активной выработкой которых организм реагирует на инфекцию.

Мнение эксперта

Артем Сергеевич Раков, врач-венеролог, стаж более 10 лет

Прямые тесты отлично работают при первых симптомах заболевания, серологические стоит проводить примерно через неделю после появления первой язвы. Иными словами, при подозрении на заражение лучше всего прибегнуть к тестам прямого типа.

Лабораторная диагностика сифилиса

Лабораторное исследование заключается в том, что в пробирке размножают участки ДНК трепонемы в условиях повторяющихся температурных циклов. На каждом этапе количество искусственно воспроизведенных копий возбудителя болезни удваивается. Специалисты называют это амплификацией фрагментов ДНК. Происходит разделение молекул по их весу, что и позволяет выявить трепонему.

ПЦР

Методика ПЦР-исследования позволит отыскать одну молекулу сифилиса даже в том случае, если она одна на тысячи других молекул. Генетический материал для ПЦР-тестирования могут забирать из непосредственно сифилитических язв, ликвора, плацентарной ткани, крови из пальца и даже семенной жидкости. Наиболее часто врачи используют именно тканевую жидкость из язв.

Эффективность ПЦР-исследования достигает 98,6%. При правильно подготовленном исследовании ложноположительные результаты при этом методе практически исключены. Также именно к данной методике врачи прибегают, если предполагают небольшое содержание трепонем в исследуемом материале. Именно этот фактор становится определяющим, если необходимо провести анализ при подозрении на врожденный сифилис.

Темнопольная микроскопия

Темнопольное микроскопическое исследование считается одним из самых дешевых, но вместе с тем эффективных методов выявления наличия бледной трепонемы, а также:

1. Для исследования используют специальный солевой раствор, в который помещают препарат. После этого на предметное стекло направляют узкий пучок яркого света. Из-за так называемого феномена Тиндаля возбудители болезни начинают светиться в темном поле раствора.
2. Лучшим материалом для подобного типа исследования также являются пробы тканевой жидкости, полученной из генитальных язв, расположенных, соответственно, на гениталиях. Это один из самых быстрых тестов, потому что результаты анализов будут готовы через несколько часов.

Однако стоит учитывать, что темнопольный метод годится для обнаружения еще живых трепонем. Соответственно, проходить такое исследование после начала наружного лечения практически не имеет смысла, так как будет почти невозможно обнаружить живые образцы возбудителя.

RIT-тест

RIT-тест предполагает пересаживание материала от зараженного человека лабораторным кроликам. Чувствительность этих животных к инфекции сифилиса достигает 100%, так что если в биоматериале пациента содержались бледные трепонемы, то они поразят и кролика.

Однако на сегодняшний день этот метод практически не используют в силу дороговизны и временных затрат. При наличии более быстрых анализов врачи предпочитают не ждать, когда симптомы болезни проявятся у животного. Тем не менее этот метод продолжают использовать в исследовательских работах, а также для того, чтобы подтвердить или опровергнуть точность других типов анализов.

Серодиагностика сифилиса

Серологические методы позволяют вычленить не сам возбудитель сифилиса в организме, а антитела, с помощью которых организм старается победить заболевание. Ученые подразделяют серологические методы на две группы, речь о которых пойдет ниже.

К нетрепонемным тестам относятся:

• РМП - реакция микропреципитации с плазмой и инактивированной сывороткой;
• RPR - тест быстрых плазменных реагинов.

Чаще всего специалисты прибегают к нетрепонемным тестам в том случае, если необходимо сделать массовый скрининг на сифилис. Это связано с тем, что такие тесты достаточно дешевы, не требуют специального лабораторного оборудования и отличаются сравнительно высокой точностью.

Также они не менее эффективны при оценке проводимого лечения. С их помощью можно оперативно следить за уровнем антител к сифилису в крови.

К трепонемным тестам относятся:

1. ИФА - иммуноферментный анализ;
2. РПГА - реакция пассивной гемагглютинации;
3. РИФ - реакция иммунофлюоресценции;
4. иммуноблоттинг;
5. ИХЛ - иммунохемилюминесценция;
6. РИБТ (РИТ) - реакция иммобилизации бледных трепонем.

Трепонемные тесты назначают в тех случаях, когда нужно убедиться, что результат нетрепонемного теста не был ложноположительным. К ним же прибегают в тех случаях, если результат скрининга при помощи трепонемного теста разошелся с результатом нетрепонемного.

Кроме того, трепонемные тесты отлично подходят для применения в том случае, если у болезни еще нет видимых проявлений, но присутствуют подозрения врача, основанные на анамнезе и результатах осмотра. К сожалению, нетрепонемные тесты в этот период малоэффективны и зачастую дают ложноотрицательные результаты.

Экспресс-диагностика сифилиса

Этот тип диагностики наиболее часто используется для определенных групп пациентов:

• Подобным тестом стоит воспользоваться каждой беременной женщине, чтобы обезопасить и себя, и будущего ребенка.
• Кроме того, воспользоваться таким методом могут люди, которые проживают в одном помещении с сифилитическими больными, не применяют контрацепцию и часто меняют половых партнеров. Также он подойдет тем, кто не может пройти полноценное обследование в больнице или клинике.

Принцип использования экспресс-теста на сифилис можно сравнить с использованием теста на беременность, однако в нем надо брать несколько капель крови.

Тест лучше всего проводить в первой половине дня натощак. За два дня до предполагаемого тестирования врачи рекомендуют не употреблять спиртное, а примерно за час до процедуры отказаться от сигарет.

Сам анализ занимает немного времени:

1. Палец необходимо продезинфицировать спиртовой салфеткой, после чего из пореза выдавить несколько капель крови на тест-устройство.
2. Затем добавить туда же идущий в комплекте реагент.
3. В среднем нужно подождать 15 минут до появления результата. Специалисты предупреждают, что если результат появился по истечении получаса, то он может быть ложным.

Как вы считаете, какой метод диагностики самый точный?

Серодиагностика Экспресс-диагностика

Стоит учитывать, что если человек заразился совсем недавно, то точность и достоверность подобного тестирования не превышает 80%. Так что приравнивать его к полноценному обследованию у специалиста точно не стоит.

Где можно сдать анализ на сифилис?

Заказать исследование биоматериала на сифилис можно:

• в любой поликлинике;

• частной клинике;

• лаборатории.

Преимущество бюджетных учреждений состоит в том, что там эта услуга бесплатна. Существенный минус заключается во времени ожидания анализа, слабом материально-техническом обеспечении некоторых государственных поликлиник и в том, что если сифилис выявят, то скрыть этот факт будет затруднительно.

Частные клиники и лаборатории согласны работать с пациентами на условиях конфиденциальности. Это подойдет тем, кто не хотел бы, чтобы о его заболевании стало известно. Но следует помнить, что бланк с результатом, где не фигурирует имя пациента, не подлежит приему ни в одной организации.

Разумеется, за анализ в частном учреждении придется заплатить, но и результат можно будет узнать через 2-3 дня. Более того, многие клиники без проблем предлагают экспресс-тестирование и сообщают о результатах анализов уже через пару часов.

Сколько стоит сдать анализ на сифилис?

Ценник на анализ зависит от его вида. Скрининговое исследование обойдется пациенту в 300-400 рублей . Анализ, при котором определяют наличие ДНК в том или ином типе биоматериала, будет стоить в районе 500 рублей.

Разумеется, цены варьируются в зависимости от лабораторий, используемых материалов и итоговой точности самого теста. В этом случае нередко работает правило, согласно которому чем тест дороже, тем он точнее.

Сифилис - коварное заболевание, которое медленно, но верно не только уничтожает внутренние органы, но и затрагивает всю нервную систему человека. К счастью, эта болезнь развивается неспешными темпами, а наука выявила эффективные методы борьбы с ней еще в то время, когда изобрела пенициллин, к которому трепонемы уязвимы до сих пор. Так что главное - вовремя пройти качественное обследование, а после этого обратиться к знающему врачу.

Также вы можете посмотреть видео в этой статье, где врач расскажет вам о РИФ анализе на сифилис.