Анализ на пцр хламидии отрицательный. О полимеразной цепной реакции (ПЦР) на хламидиоз. Диагностика инфекции хламидиоз

Анализ на хламидии у женщин изучается методикой ПЦР, выявляя с высокой точностью наличие и концентрацию вредоносных бактерий в организме на основе ДНК исследований клеток биоматериала.

Анализ на хламидии у женщин является важным исследованием . Ведь хламидийная инфекция – это не просто болезнь, передающаяся посредством половой близости, но и такое коварное заболевание, способное без особых проявлений симптоматики стать причиной развития первичного бесплодия либо привычного невынашивания плода.

Исследования, проводимые методикой ПЦР, делают с целью диагностирования инфекций, провоцирующих следующие вирусы, как микоплазма, уреаплазма, хламидии и прочие. Для обследования наличия хламидиоза и прочих инфекционных заболеваний, нужно сдавать кровь на анализы, мазки на бактериологический посев либо соскоб.

Если сдать мазок на посев либо соскоб, то хламидиоз, как наиболее коварное заболевание, передающееся при половых контактах, может не обнаружиться. Ведь атипичные бактерии, как хламидии, размножаются и концентрируются внутри иных клеток организма. Именно потому, такое заболевание, как хламидиоз (и уреаплазма), практически не идентифицируется при исследованиях в рамках привычных анализов.

Период инкубационного развития хламидий до определения выраженной симптоматики длится до 3-х недель. Именно за это время инфекция успевает встроиться в клетку организма, как у мужчин, так и у женщин. Диагностика ПЦР позволяет раньше выявить вирус и не дать распространится такому возбудителю, как уреаплазма.

Когда организм уже захвачен болезнью, проявляется следующая симптоматика у мужчин:

• это моча мутного цвета;
• утренние выделения из мочеиспускательного канала;
• зуд и признаки жжения при мочеиспускании;
• общее состояние слабости с повышением температуры тела;
• выделения с кровянистыми примесями при мочеиспускании и даже наблюдается такое, как кровянистое семяизвержение.

Признаки заболевания хламидиозом у женщин это:

• присутствие неприятного запаха гениталий;
• желтоватые выделения слизистого состава из влагалища;
• зуд и неприятное жжение в процессе мочеиспускания;
• слабость самочувствия с незначительным повышением температуры.

Такие возбудители инфекций, как хламидии и уреаплазма, являются опасными, поскольку могут выказывать слабую симптоматику для обнаружения, а со временем исчезать. Запущенная форма деятельности в организме возбудителей, как хламидии и уреаплазма, приводит к поражению внутренних органов, как у мужчин, так и у женщин.

Анализ на хламидии – методики выявления хламидиоза для мужчин и женщиин

Диагностировать хламидиоз допустимо с использованием лабораторного метода исследований, где берут биоматериал для работ. Существует ряд методик выявления возбудителей типа хламидий и уреаплазма:

• (это генетически-биологическое исследование методов полимеразной цепной реакции) выявляет со 100% точностью вредоносные тела в биоматериале типа ареаплазма, хламидии и прочие.
• Бактериологическое культуральное обследование, это где берут материал на посев для выращивания, обнаружения и идентификации бактерий (хламидии, уреаплазма и прочих) в специальной питательной среде.
• ИФА (это иммуноферментный анализ) нужно сдавать, чтобы выявить антитела к идентифицированному возбудителю.
• РИФ (иммунофлуоресцентная микроскопия) – анализ, который нужно сдать, дабы основательно выявить хламидии.

Возбудитель мочеполового хламидиоза – Chlamidia trachomatis - микроорганизм, способный размножаться только внутри клетки (чаще всего клетки эпителия мочеполовых органов). Хламидиоз часто характеризуется скрытым и бессимптомным течением, чем и обусловлена частота возникающих на его фоне осложнений.

Долгое время, до создания метода амплификации нуклеиновых кислот, диагностика хламидиоза была затруднена, так как при обычном микроскопическом исследовании возбудитель не виден. Была попытка внедрения цитологического метода с окраской мазка по Романовскому-Гимзе и выявлением специфических внутриклеточных включений.

Но такой метод требовал значительных затрат экономических ресурсов, времени, наличия опытного квалифицированного лаборанта. И это все при низкой информативности данного метода - порядка 10%.

Показать всё

1. Введение

Более подробно о хламидиях трахоматис (Chlamydia trachomatis) и путях заражения можно узнать в этой статье (). А здесь мы подробнее остановимся на методах диагностики мочеполового хламидиоза и расшифровке возможных результатов анализов.

Самой первой серологической пробой, внедренной для подтверждения диагноза "урогенитальный хламидиоз", была реакция связывания комплемента (сокращенно РСК). Проба быстро утратила свою актуальность из-за высокой частоты ложноположительных результатов.

На протяжении двух десятков лет одним из самых информативных способов диагностики урогенитального хламидиоза считался метод прямой иммунофлюоресценции с использованием моноклональных антител. На фоне вышеперечисленных методов он отличался несколько более высокими показателями специфичности и чувствительности. Вместе с тем, метод требовал обеспечения лаборатории дорогостоящим оборудованием и реагентами.

Еще один метод, актуальный и по сей день, – выявление хламидий в культуре клеток. Этот метод будет описан ниже.

Так или иначе, сейчас повсеместно распространен другой анализ на хламидии - исследование отделяемого или соскоба из уретры, влагалища или цервикального канала методом ПЦР.

1. 1 ПЦР-диагностика. Федеральными и Европейскими клиническими протоколами для диагностики урогенитального хламидиоза рекомендован метод амплификации ДНК. В отношении первичного выявления инфекции его специфичность равна 100%, чувствительность 98-100% (уровень доказательности А, уровень обоснованности I).
2. 2 NASBA (метод амплификации РНК).
3. 3 Выделение хламидий в культуре клеток.
4. 4 Цитологический метод. Этот метод исследования мазка малоинформативен при диагностике мочеполового хламидиоза (специфичность 10-12%): есть небольшая вероятность обнаружения внутриклеточных включений – так называемых телец Гальбершетдера-Провачека. Помимо этого, при микроскопии проводится подсчет числа лейкоцитов (увеличение их количества - доказательство воспалительного процесса), а также исследование флоры и обнаружение дрожжеподобных грибков.
5. 5 Серологические тесты.
6. 6 Последние три метода (3,4,5) могут применяться только в определенных ситуациях, когда недоступны методы амплификации ДНК и РНК (ПЦР и NASBA).

Анализы на хламидии назначаются:

1. 1 Скрининг половых инфекций при беременности и предгравидарная подготовка.
2. 2 Желательно ежегодно сдавать анализы женщинам и мужчинам в возрасте до 25 -30 лет, а также лицам, не имеющим постоянных партнеров на протяжении последнего года или недавно сменившим партнера.
3. 3 Лицам, имеющим симптомы уретрита, вагинита, цервицита.
4. 4 Женщинам с ВЗОМТ (сальпингоофорит, эндометрит и так далее).
5. 5 При обнаружении у пациента любой другой половой инфекции.
6. 6 Мужчинам молодого возраста с воспалением придатков яичка и орхитом.
7. 7 При подготовке к внутриматочному вмешательству.
8. 8 При пневмонии и гнойном конъюнктивите у новорожденного.

2. ПЦР на Chlamydia trachomatis

Суть метода ПЦР - обнаружение генетического материала (ДНК) в исследуемом образце и его достраивание путем добавления «строительного» материала (дезоксинуклеорибофосфатов). В результате цепь ДНК удлиняется, ее обнаружение становится возможным с помощью электрофореза и/или флюоресценции.

Все манипуляции выполняются в специальном приборе – амплификаторе, который самостоятельно контролирует смену температур и протекающих фаз соответственно числу необходимых циклов амплификации.

ПЦР позволяет обнаружить хламидии уже через 3 дня после заражения, при высоком риске исследование повторяют через 2 недели после предполагаемого инфицирования.

В настоящее время набирает большую популярность . С его помощью исследуется и качественная, и количественная характеристика влагалищной микрофлоры.

ПЦР в режиме реального времени характеризуется короткими сроками выполнения, высокой специфичностью и чувствительностью (порядка 88-90%).

Но для подтверждения урогенитального хламидиоза ряд авторов рекомендуют использовать монокомпонентные наборы для ПЦР из-за более высокой их чувствительности (100%) в отношении хламидий трахоматис.

Совет этот актуален в ситуации, когда врач подозревает наличие хламидийной инфекции у пациентки, и исследование проводится для верификации диагноза. При отсутствии специфических симптомов у женщины более целесообразно проведение комплексной ПЦР (уровень обоснованности II).

3. Амплификация РНК хламидий (NASBA)

Это относительно новый для России, но более информативный молекулярно-биологический метод. Суть его заключается в обнаружении в материале (мазке, соскобе, моче и так далее) цепей РНК, наличие которых сопровождает процесс построения и жизнедеятельности клетки хламидии.

РНК является транспортировщиком генетической информации от ДНК и строителем клеточных структур возбудителя путем синтеза белка.

Именно по наличию РНК в положительных результатах NASBA можно судить об эффективности проводимой антибактериальной терапии: оценивается жизнеспособность хламидий. ПЦР, основанная на обнаружении только ДНК, такой возможности не имеет.

NASBA может применяться для контроля излеченности в более ранние сроки по сравнению с ПЦР. Для контроля эффективности лечения данный метод актуален по прошествии всего 14 дней после последнего приема антибиотиков.

4. Как правильно сдавать анализ на хламидии женщинам?

Женщины анализ на хламидии методами ПЦР или NASBA могут сдать у врача-гинеколога, дерматовенеролога.

Материалами для исследования у женщин обычно служат:

• Соскоб из уретры, влагалища, цервикального канала вне менструации. Условием является наличие в забранном материале клеток эпителия. При взятии обычного мазка, слизистого отделяемого, гноя и тому подобного, результат может быть не информативным.

Соскоб на анализ у женщин берут из наружного отверстия уретры, цервикального канала и заднего свода влагалища.

1. 1 При использовании универсального зонда: после взятия материала рабочая часть зонда отламывается и погружается в пробирку «Эппендорф» с консервирующим раствором.
2. 2 При использовании ложечки Фолькмана: ее ополаскивают в пробирке с консервирующим раствором. После этого емкость плотно закрывают, а инструмент дезинфицируют и стерилизуют.
• Первая порция свободно выпущенной мочи. Именно в первой порции мочи сосредоточено максимальное количество слущенных эпителиальных клеток урогенитального тракта. У женщин первая порция свободно выпущенной мочи менее информативна (чувствительность 80-90%), поэтому применяется намного реже, чем соскоб. При этом нет доказательств, что утренняя моча более диагностически значима, чем, например, дневная (уровень обоснованности II).

Моча собирается пациенткой самостоятельно в чистый стерильный сухой контейнер. Для исследования достаточно порядка 10 мл мочи. Рекомендуемый период хранения - 24 часа при соблюдении необходимого уровня температур (+2С…+8С).

5. Особенности забора материала у мужчин

Мужчины сдать анализы на хламидии могут у врача-уролога, врача-дерматовенеролога, врача-репродуктолога, андролога.

Материалами для исследования у мужчин обычно служат:

• Отделяемое из уретры, соскоб из уретры. Подготовка пациента: перед забором материала не мочиться 2-3 часа, при обильных выделениях - 15-30 минут. При наличии обильных патологических выделений (например, гноя) рекомендуется удалить их ватным тампоном.

Процедура взятия соскоба для мужчин достаточно неприятна, порой болезненна. Соскоб забирается универсальным зондом из наружного отверстия уретры. После забора рабочая часть зонда отламывается и погружается в пробирку «Эппендорф» с консервирующей жидкостью.

• Первая порция свободно выпущенной мочи (чувствительность выше, чем у женщин - 85-95%).
• По показаниям для анализа на хламидии у мужчин может забираться секрет предстательной железы (при бесплодии, простатите и др. заболеваниях). Подготовка включает половое воздержание в течение 2 дней. Секрет простаты берет квалифицированный специалист после массажа предстательной железы. Головку полового члена необходимо очистить стерильным ватным тампоном.

После завершения массажа выделившийся сок предстательной железы в количестве 0,5-1 мл собирают в сухую пробирку «Эппендорф» и плотно закрывают. При отсутствии секрета - собирают первую порцию мочи (в ней и будет содержаться весь секрет) по аналогии с обычной вышеописанной техникой.

Максимальный срок хранения всех вышеперечисленных материалов – 24 часа при строгом соблюдении температурного режима в диапазоне +2С…+8С.

Доставляется материал в специальном термоконтейнере с охлаждающими элементами. Для долгосрочного хранения взятый материал необходимо заморозить на срок не более 1 месяца при температуре -20С. Допускается только однократное размораживание материала.

6. Расшифровка результатов ПЦР и NASBA

1. 1 Как правило, результаты ПЦР и NASBA доступны уже через 24-36 часов, в частных лабораториях сроки готовности результатов удлинены.
2. 2 Результат может быть "положительный" (хламидии обнаружены, то есть у пациента хламидиоз) и "отрицательный" (хламидии не обнаружены, то есть у пациента мочеполового хламидиоза нет или получен ложноотрицательный результат).

При использовании методов амплификации нуклеиновых кислот (МАНК) для грамотной интерпретации результатов необходимо соблюдать некоторые условия:

1. 1 Контрольное исследование для оценки эффективности терапии назначается не ранее, чем через 1-1,5 месяцев после окончания приема препаратов (для ПЦР), и не ранее, чем через 14 дней для NASBA. Метод ПЦР не подразумевает определение жизнеспособности обнаруженных микроорганизмов, поэтому необходимо выждать полный цикл смены эпителия.
2. 2 При сборе первой порции мочи после последнего акта мочеиспускания необходим перерыв не менее 3 часов. При обильных патологических выделениях из уретры мочу собирают через 15-20 минут после последнего акта мочеиспускания.
3. 3 Существует мнение, что изменения гормонального фона приводят к появлению в исследуемом материале ингибиторов амплификации (слизь, кровь, гной и другие компоненты). Данная ситуация наиболее актуальна в период беременности, у женщин.

Предлагалось множество способов устранения данной проблемы, но пока ни один из них не является общепризнанным:

1. 1 Ситуация с ингибиторами амплификации актуальна для небеременных женщин на 3 неделе после менструации.
2. 2 При заборе материала в первые дни после менструации есть вероятность ложноотрицательного результата за счет недостаточного накопления возбудителя в эпителии. Таким образом, оптимальный период для взятия соскоба – 4 неделя после менструации.
3. 3 Нет никакой необходимости в специальной подготовке пациентки (например, введения каких-либо препаратов, соблюдения определенной диеты) перед исследованием. На результат это не повлияет.
4. 4 Существует проблема так называемого конкурентного ингибирования. Подобная ситуация возникает при использовании лабораторией наборов для ПЦР-диагностики нескольких видов микроорганизмов. При значительном преобладании в образце какого-либо одного вида возбудителя последний может "замаскировать" наличие других видов микроорганизмов. Результат будет ложноотрицательный.
5. 5 При подозрении на ложноположительный результат возникает необходимость повторного исследования. Эта ситуация актуальна при бессимптомном течении инфекции с низкой бактериальной нагрузкой. В этом случае возможно исследование того же образца, либо забор нового, а также применение другого теста или даже метода исследования (класс рекомендаций В, уровень обоснованности II). При выявлении большого количества хламидий в исходном материале повторное исследование будет лишним и экономически необоснованным.

7. Иммуноферментный анализ

Согласно последним Федеральным рекомендациям, иммуноферментный анализ (ИФА) не применяется для диагностики неосложненного урогенитального хламидиоза (цервицитов, уретритов и др.). Такое «недоверие» обусловлено тем, что ИФА больше актуален для тяжелых, глубоких поражений хламидиями C. Trachomatis.

Метод ИФА основан на обнаружении в крови специфических антител, вырабатываемых в ответ на антигены хламидий. По сочетанию трех классов иммуноглобулинов в крови пациента можно судить о тяжести и длительности инфекционного процесса.

Как уже было сказано, данный метод при выявлении урогенитального хламидиоза имеет ряд недостатков:

1. 1 Не информативен в диагностике восходящей инфекции, цервицита и уретрита.
2. 2 Высокая частота перекрестных реакций.
3. 3 Высока частота ложноположительных реакций.
4. 4 Не подходит для контроля излеченности после проведенной антибактериальной терапии, так как неизвестно время существования в крови специфических антител;
5. 5 Позволяет диагностировать преимущественно глубокие поражения, например, врожденный хламидиоз у новорожденных (класс рекомендаций А, уровень обоснованности I).

Для проведения ИФА используется венозная кровь пациента, взятая натощак. В защиту данного метода можно отметить:

1. 1 Его более низкую стоимость, по сравнению с ПЦР.
2. 2 Удовлетворительная специфичность порядка 90%.
3. 3 Быстрота выполнения.
4. 4 Простота забора и хранения материала.

8. Выявление хламидий в культуре клеток (на среде McCoy)

Этот метод уникален тем, что позволяет оценить не только качество проведенной терапии, но и определить чувствительность хламидий к различным группам антибактериальных препаратов.

Суть метода состоит в заражении обработанной культуры клеток забранным материалом с последующим посевом на питательную среду и инкубированием в течение двух суток. Наличие хламидий в полученных клетках определяется методом ПЦР.

Для определения чувствительности к антибиотикам в обработанную культуру клеток вносят ростовую среду с содержанием определенного антибактериального средства и инкубируют в течение 5 суток.

Эффективность препарата определяют по отсутствию или замедлению роста в определенных группах. Наличие роста свидетельствует о резистентности к добавленному в питательную среду антибиотику.

Недостатки этого метода диагностики - длительность (7 дней) и дороговизна, поэтому в клинической практике он используется в крайне редко. Обычно показанием для его назначения служит длительная неэффективная антибактериальная терапия.

9. Экспресс-методы

За рубежом в качестве рутинных, недорогих методов выявления хламидийной инфекции используются модифицированные серологические тесты.

9.1. Тест-система Chlamidia-antigen ELISA medac

Тест-система работает по принципу твердофазного ИФА-анализа. Готовая тест-система покрыта полученными путем генной инженерии, готовыми специфическими антителами. Данные антитела связаны со специальным ферментным комплексом.

При связывании антигенов с антителами ферменты высвобождаются, появляется желто-зеленое свечение, интенсивность которого и учитывает спектрофотометр.

В отличие от распространенного ИФА, где материалом для исследования служит кровь, при использовании данной тест-системы субстратом служат мазок или соскоб, взятые у женщины, мужчины. Чувствительность этого метода - около 65-70%, а специфичность 90-100%.

9.2. РИФ

В основе реакции иммунофлюоресценции (РИФ) лежит прямое связывание антигенов с мечеными антителами, дающими зеленое свечение. Хламидийные тельца подсвечиваются внутри клетки. Результат оценивается при люминисцентной микроскопии.

Чувствительность данного метода - около 50%, что связано с высокой частотой ложных результатов. Это обусловлено и субъективным восприятием результата (исследование проводит лаборант), и высокой вероятностью перекрестных реакций, и нарушением техники забора биологического материала. С помощью данного метода невозможно оценить эффективность проведенного лечения.

На фоне всех недостатков главными плюсами РИФ остаются низкая стоимость, простота выполнения и короткие сроки получения результата. Именно поэтому РИФ еще используют в некоторых странах в качестве рутинного исследования на мочеполовой хламидиоз.

Если анализы показали хламидии в моче, это плохо. Значит, речь идет о таком непростом заболевании, как хламидиоз. Относится он к ЗППП, а потому весьма опасен для репродуктивного здоровья как мужчин, так и женщин. Достоверно ли можно определить хламидиоз по моче, какие способы исследования являются более качественными?

Хламидии используют весьма оригинальный среди бактерий способ жить и размножаться. Они встраиваются в человеческие клетки, причем каждый вид хламидий «подбирает» себе определенный их вид. В пораженных тканях возникают воспаления, нарушается иммунитет, начинаются спаечные процессы. В настоящее время хламидиоз встречается довольно часто, большей частью потому, что может передаваться не только половым путем, но и бытовым (предметы гигиены, выделения слизистых).

Как выявить хламидиоз

Для того, чтобы узнать, есть ли хламидии в моче, недостаточно провести обычный анализ. Необходимо исследование на скрытые инфекции. Один из таких способов – ПЦР мочи на хламидии, то есть метод полимеразной цепной реакции.

При ПЦР моча на хламидии исследуется день-два, то есть результат получить можно довольно скоро. Он практически на 100% (если точно, то до 96%) выявляет наличие возбудителей в организме, а ложный положительный ответ возможен только в случаях, когда нарушены правила забора и проведения анализа. Данный анализ на хламидии в моче назначается не только по показаниям, но и для профилактики: при ежегодном медосмотре и постановке на учет беременных женщин.

Есть еще один способ определить хламидиоз по моче – это посев, или культуральный метод. На сегодня он является весьма дорогим, но и эффективным, выявляя инфекцию в 80-90% случаев. Кроме того, по результатам, которые дает посев мочи на хламидии, сразу станет известно, какой антибиотик сможет победить возбудителя. В рутинных исследованиях данный способ не применяется.

Лечение хламидиоза

Если выявлено заболевании, внимательно обследовать и лечить нужно обоих половых партнеров, при этом на время терапии им следует отказаться от близости. Только врач, для мужчин это уролог-андролог, для женщин - гинеколог или венеролог, может грамотно подобрать лечение хламидиоза. Комплексное лечение будет включать не только устранение воспаления, но также укрепление иммунитета, рационализацию питания, прием витаминов. Пренебрежение терапией может привести к серьезным проблемами, вплоть до бесплодия. Учеными уже давно доказано, что нередко развивается в семейной паре. Подробнее об этой проблеме рекомендуем почитать по ссылке.

В диагностике хламидиоза из всех существующих методов самым достоверным признан метод ПЦР.* Метод полимеразной цепной реакции для диагностики хламидиоза имеет чувствительность 98-100%.

Преимущества ПЦР диагностики при хламидиозе

1. Прямое определение хламидий в биоматериале.

Ряд методов, применяемых в диагностике хламидиоза, например, метод ИФА, выявляет только антитела и/или антигены возбудителя, что не является прямым подтверждением хламидийной инфекции, а свидетельствует лишь о возможном ее наличии.

Метод полимеразной цепной реакции (метод ПЦР) – молекулярно-биологический метод, который направлен на выявление специфических для хламидий фрагментов ДНК и напрямую указывает на наличие инфекции.

2. Высокая специфичность.

Специфичность метода ПЦР в диагностике хламидиоза достигает 100%. Данный факт обусловлен тем, что в биоматериале, подвергаемом анализу, выявляется фрагмент ДНК, генетический материал хламидий. ДНК является неотъемлемой частью любого микроорганизма и не может существовать вне возбудителя, кроме случаев применения антибактериальных препаратов, когда ДНК возбудителя может определяться в течении месяца.

Этого нельзя сказать об иммунологических методах анализа, при которых часто встречаются ложноположительные реакции из-за перекрестно-реагирующих антител и антигенов.

3. Высокая чувствительность.

Для выполнения ПЦР анализа достаточно присутствия в биоматериале единичных клеток хламидий. Аналитическая чувствительность ПЦР анализа 10-100 клеток в биоматериале, когда у других тестов 103-105 клеток (микросокпический, бактериологический методы).

Существующие рутинные методы диагностики хламидийной инфекции – микроскопические, иммунологические, бактериологические – не позволяют установить возбудителя у 20-40% инфицированных лиц, в то время как метод ПЦР позволяет выявить хламидии практически у 100% больных.

4. Универсальность метода ПЦР.

Наряду с выявлением ДНК хламидий в исследуемом биоматериале метод ПЦР позволяет одновременно обнаружить несколько возбудителей, например, трихомонад, гонококков и др.

5. Скорость получения результата.

Проведение ПЦР анализа полностью автоматизировано, что позволяет получить результаты в самые оптимальные сроки, и, как следствие, дает возможность получить быстрое и эффективное лечение.

6. Диагностика латентных и вялотекщих форм хламидиоза.

Урогенитальная хламидийная инфекция отличается бессимптомным течением, например, более чем у 70% женщин хламидиоз протекает бессимптомно. Поэтому ранее рутинные методы диагностики не позволяли выявить эту инфекцию. В последние годы в связи с широким применением метода ПЦР в клинической практике фиксируется больше случаев заболевания.

Хламидиоз: особенности

Неосложненная форма хламидиозной инфекции протекает у мужчин чаще в форме воспаления уретры (уретрит), у женщин – в форме слизисто-гнойного воспаления слизистой оболочки шейки матки (цервицит), уретры (уретрит).

Преимущественно урогенитальная хламидиозная инфекция протекает в малосимптомной форме и начинает проявляться на стадии осложнений.

Для полноценной диагностики урогенитального хламидиоза методом ПЦР берут соскоб из уретры, мочу, секрет предстательной железы у мужчин, и соскоб из цервикального канала, влагалища у женщин.

К распространенным осложнениям урогенитального хламидиоза относят:

• орхоэпидидимит, эпидидимит, простатит, стриктуру уретры;
• цистит,
• ВЗОМТ (воспалительные заболевания органов малого таза);
• эрозивные изменения шейки матки;
• бесплодие.

К возможным осложнениям хламидиоза при распространении за пределы урогенитального тракта относят:

• хламидийный конъюктивит;
• хламидийный фарингит;
• хламидийный гепатит,
• болезнь Рейтера (сочетающий в себе поражение мочеполовых органов, суставов и коньюнктивы); спаечную болезнь специфической этиологии.

Проведение ПЦР-диагностики хламидийной инфекции актуально для пациентов:

• в целях профилактического обследования;
• с характерными жалобами или подтвержденным диагнозом заболевания, передаваемого половым путем;
• при планировании беременности;
• обследование беременных;
• при отягощенном акушерско-гинекологическом анамнезе;
• с подозреним на урогенитальный хламидиоз;
• перед оперативными вмешательствами на половых органах и органах малого таза;
• с подозрением на коньюктивит, артрит хламидийной этиологии.

В лабораториях CMD для проведения ПЦР исследования имеется лучшее оборудование и высококвалифицированный персонал. На всех этапах ПЦР исследования – от взятия биоматериала до выдачи готового результата - соблюдаются все требования менеджмента качества, чем полностью исключается попадание чужеродного генетического материала и получение ложноположительного результата.

По статистике, в мире ежегодно заболевает хламидиозом 100 млн. человек. Согласно информации ВОЗ, урогенитальный хламидиоз – это самая частая инфекция, передающаяся половым путём. Заболеванию чаще подвержены женщины и мужчины, но заражаются и дети. Ежегодно 100 тыс. женщин остаются бесплодными по причине хламидиоза. Инфекция является причиной мертворождённого плода, преждевременных родов и смерти новорождённых.

Для успешного лечения важно правильно поставить диагноз. Сегодня мы рассмотрим точный метод диагностики хламидиоза – анализ ПЦР. Узнаем, как следует готовиться к анализу и что нельзя делать мужчинам и женщинам перед сдачей материала.

Хотя инфекция чаще передаётся половым путём, возможно внутриутробное заражение плода или во время родов. Заболевание вызывает атипичная бактерия Chlamidia trachomatis. Возбудитель заболевания наполовину вирус, наполовину бактерия, и поэтому трудно поддаётся обнаружению.

Хламидиоз — заболевание, передающееся половым путем

Инкубационный период заболевания 2-4 недели. Пути заражения хламидиозом – сексуальный вагинальный и анальный. Бытовой путь заражения происходит в сауне и бане. В домашних условиях возможен перенос инфекции с загрязнённых рук на глаза или при пользовании общим полотенцем. Дети заражаются во время родов при прохождении по родовым путям заражённой матери.

Какие заболевания вызывает хламидия

Заражение хламидиозом происходит во время контакта выделений из половых органов со слизистой оболочкой партнёра. Частые последствия инфекции:

• У мужчин заболевание протекает в виде воспаления мочевыводящего канала – уретрита.
• Другие частые клинические формы хламидиоза у мужчин – цистит и простатит.
• Воспалительный процесс шейки матки у женщин – цервицит.
• Проктит – воспаление прямой кишки.
• Воспаление фаллопиевых труб и внутренней оболочки матки – сальпингит и эндометрит.
• Внематочная беременность. При внематочной беременности в 25–50% случаев выявляютсяхламидии в мазке.
• Бесплодие у женщин имужчин развивается в результате воспалительного процесса или рубцовых изменений органов малого таза.

Хламидиоз относится к восходящему типу инфекций. Они начинаются с нижнего мочеполового тракта, а поднимаясь выше, вызывают воспалительные и спаечные процессы, угрожающие бесплодием. Хламидиоз у мужчин вызывает нарушение потенции и бесплодие.

Круг заболеваний расширяется при ослабленной иммунной системе. При этом поражаются органы дыхания в виде хламидийной пневмонии. Развиваются хламидийные артриты и конъюнктивиты.

Выявление хламидиоза затрудняется тем, что в 50–67% случаев инфекция протекает бессимптомно или проявляется признаками, похожими на другие инфекции половых путей.

В настоящее время самый чувствительный метод выявления хламидиоза – анализ ПЦР.

Он обладает 100% специфичностью и является достоверным методом диагностики, не требующим подтверждения другими анализами. Аббревиатура ПЦР – полимеразная цепная реакция. Принцип анализа основан на обнаружении ДНК хламидии.

Желательно использовать несколько методов диагностики

У анализа ПЦР имеются преимущества перед другими методами:

• Реакция очень чувствительна – обнаруживает мельчайшую частичку возбудителя заболевания.
• АнализПЦР – это быстрый метод обследования. Постановка анализа длится несколько часов, а ответ выдают на следующий день.
• Методпозволяет обнаруживать непосредственно возбудителя болезни, а не реакцию организма после инфицирования. Это преимущество позволяет выявить возбудителя даже в инкубационном периоде болезни, когда у человека нет признаков заражения.
• ПЦР –это 100% специфичный метод. Он основан на обнаружении ДНК, специфичной только для этого возбудителя болезни. ДНК (дезоксирибонуклеиновая кислота) – это формула (код) генетической цепочки всех живых созданий от вируса до слона. У каждого существа своя специфическая цепочка ДНК.
• Отсутствие противопоказаний для постановки реакции.

Комплекс лабораторных исследований помогут выявить возбудителя и стадию заболевания

Метод ПЦР имеет и некоторые недостатки:

• Анализможет давать ложноположительный результат при несоблюдении правил проведения анализа. Поэтому лаборатория для проведения ПЦР оснащена фильтрами воздуха. Требование к фильтрации в лаборатории составляет 99, 9%.
• ПЦР даёт ложноотрицательный ответ даже при развёрнутой картине заболевания, если не соблюдены правила взятия материала.
• Положительный результат возможен в случае перенесённой и вылеченной инфекции, потому что метод определяет и живого, и мёртвого возбудителя болезни.

Интерпретировать результат должен лечащий врач. В случае если врач сомневается в активности хламидиоза при положительном ответе ПЦР, он назначает ИФА (иммуноферментный анализ). Метод ИФА определяет иммунный ответ, который уточняет стадию хламидиоза – острого процесса или перенесённой инфекции.

Подготовка к забору материала для ПЦР у мужчин

Что нельзя делать мужчинам, перед тем как сдавать анализ:

• за 3 часа до забора мочи нельзя мочиться;
• использовать растворы для дезинфекции;
• применять бактерицидное мыло;
• нежелательна интимная близость за 36 часов до взятия материала.

Правильная подготовка важна для выдачи результата ПЦР. Ошибки этого этапа дают ложноположительный или ложноотрицательный результат.

Для достоверного ответа анализа нужно правильно сдавать анализ. Перед забором материала для ПЦР у женщин нельзя:

• мочиться 3 часа, еслианализ берут из уретры;
• нельзя применять бактерицидное мыло;
• вагинальные свечи, противовоспалительные и дезинфицирующие жидкие средства не применяют за 36 часов до взятия материала;
• нежелателен половой контакт за 36 часов до забора материала;
• нельзя спринцеваться;
• сдавать анализыво время менструального цикла.

Подготовка к сдаче анализа не представляет особых сложностей

От того, насколько правильно взят материал, зависит достоверность результата, поэтому материал для ПЦР должен брать врач. Специалисты лабораторий считают момент взятия материала самым важным этапом диагностики.

Анализ ПЦР выявляет ДНК хламидии. Для исследуемого материала у мужчин берут секрет предстательной железы, сперму или соскоб из уретры. В некоторых случаях для ПЦР у мужчин берут кровь. У женщин берут мазок или соскоб из уретры, влагалища или цервикального канала. При половом пути заражения для выявления урогенитального хламидиоза берут соскоб с больного органа, а не мазок на хламидии. Для уточнения диагностики трахомы берут соскоб с конъюнктивы глаз.

При проведении ПЦР в пробирки с материалом добавляют специальные реактивы и ставят в прибор. Метод осуществляется прибором автоматически в заданном режиме. Ответ результата ПЦР выглядит как положительный или отрицательный. Если в исследуемом материале обнаружены хламидии, выдаётся положительный ответ.

Нет ни одного метода, который бы на 100% точно выявил хламидиоз и фазу развития процесса.

ПЦР - экспериментальный метод биохимии

Поэтому, если в анализе ПЦР обнаружены хламидии, следует уточнить стадию заболевания анализом ИФА. Интерпретацию анализов проводит врач с учётом анамнеза клинической картины заболевания.

Показания для ПЦР

Анализ ПЦР назначается в таких случаях:

• острая урогенитальная инфекция, при которой появляется жжение, зуд, изменившийся запах выделений из половых органов и дискомфорт при мочеиспускании. У мужчин в конце мочеиспускания появляется кровь.
• Затянувшаяся инфекция мочеполового тракта у женщин – кольпит, эрозия шейки матки или остроконечные кондиломы.
• Патологические изменения при беременности – отягощённый акушерский анамнез.
• Выкидыши и мертворождение.
• Бесплодие.

Анализ ПЦР назначается и для проверки эффективности антибактериального лечения хламидиоза, но не раньше чем через месяц из-за возможного получения ложноположительного результата.

В заключение напомним, хламидиоз – это наиболее распространённая урогенитальная инфекция, передающаяся половым путём. Заболевание является причиной женского и мужского бесплодия. Инфекция поражает детей внутриутробно или при рождении. На современном этапе достоверный и специфичный метод диагностики болезни – анализ ПЦР. Для анализа используется мазок или чаще соскоб эпителиальных клеток, а также кровь, осадок мочи или сперма. В ряде случаев для уточнения стадии хламидиоза метод ПЦР дополняется анализом ИФА.